没食子儿茶素没食酸酯在溶液环境中的稳定性研究

摘要

茶多酚类化合物是茶叶的主要的生理活性成分，儿茶素又是这些活性成分的主要部分。儿茶素主要包括EC（表儿茶素）、ECG（表儿茶素没食子酸酯）、EGC（表没食子儿茶素）、EGCG（表没食子儿茶素没食子酸酯）、GCG（没食子儿茶素没食子酸酯）、GC（没食子儿茶素）、CG（儿茶素没食子酸酯）和C（儿茶素）等八种化合物，它们具有防癌抑癌、抗菌消炎、清除自由基、抑制及预防高血压和心血管疾病等多重功效。EGCG作为茶叶中含量最高的儿茶素化合物其生物活性丰富多样，因此对它的研究也开展得最为深入。对其稳定性的研究发现，该化合物容易受到环境因素如温度、溶液pH值、金属离子、氧分压等的影响。在研究中还发现GCG在有些方面的效果优于EGCG，如抑菌抗菌、抑制脂质氧化与过氧化、预防高血压等。GCG与EGCG二者互为立体异构体，从结构上分析GCG的稳定性较EGCG高。迄今为止，较少有关于GCG的报道，对其稳定性的研究是少之又少，因此研究GCG的稳定性以期弥补EGCG稳定性与生物利用率的不足。
　　通过实验发现GCG的稳定容易受到多种环境因素的影响。采用纯水、自来水和11种盐来研究GCG的稳定性与它们的关系，结果表明不同金属离子对其稳定性的影响存在差异，其中影响程度比较大的有Cu2+、Fe3+、Fe2+等;同时发现金属离子浓度越高对其稳定性的影响越大。当改变溶液的pH值，发现GCG在偏弱酸性的环境中稳定性更好。还发现，在40℃以下GCG的稳定性几乎不受温度影响，而40℃以上随温度的上升其含量下降的速度越来越快。GCG在不同的缓冲溶液(50mM，pH7.4)中均不稳定，在PBS（磷酸盐缓冲液）中降解最快，Tris-HCl（三羟甲基氨基甲烷）次之，MOPS（3-(N-吗啉基)-丙磺酸）最慢。根据GCG在不同体系中的稳定性变化规律，利用HPLC（高效液相色谱）、LC-MS（液相色谱-质谱联用仪）技术初步检测鉴定其在各体系中的降解产物，发现GCG在沸水中主要发生酯水解反应，同时伴有少量的异构化为EGCG的反应，降解产物主要有GA、GC/EGC及EGCG;室温下，在自来水、缓冲体系中GCG的降解产物均有GA、theasinensin A/D、GC、P2、GCG醌等化合物。
　　为了使GCG能有得以稳定存在的缓冲溶液，对不同的体系进行了优化。各体系的优化结果如下:自来水中加入终浓度大于0.5mM的EDTA（乙二胺四乙酸），GCG的降解可得到有效抑制;Tris-HCl缓冲液中加入VC(抗坏血酸)(终浓度≧1mM)就可使GCG稳定存在。

目录

声明

摘要

缩略语对照表

第一章 绪论

1．1 茶多酚化合物的种类与特性

1．2 儿茶素化合物的研究现状

1．3 EGCG的研究现状

1．3．1 EGCG的应用及本身的不足之处

1．3．2 EGCG的稳定性研究

1．3．3 EGCG的氧化、异构化、聚合、降解产物的分离鉴定

1．4 GCG的研究现状(结构、纯度、生物学功能)

第二章 GCG在不同溶液中的稳定性研究

2．1 试剂与仪器

2．1．1 试剂

2．1．2 仪器

2．2 实验方法

2．3 实验结果

2．3．1 不同水中GCG的稳定性

2．3．2 在不同盐溶液中GCG的稳定性

2．3．3 不同pH值对GCG稳定性的影响

2．3．4 溶液中的溶解氧与GCG稳定性的关系

2．3．5 不同温度下GCG的稳定性

2．3．6 不同缓冲盐溶液体系中GCG的稳定性

2．4 实验结果分析与讨论

2．4．1 金属离子对GCG稳定性的影响

2．4．2 溶液酸度对GCG稳定性的影响

2．4．3 溶解氧对GCG的稳定性影响

2．4．4 温度与GCG的稳定性

2．4．5 缓冲剂类型对GCG稳定性的影响

第三章 主要体系中GCG的分解产物

3．1 试剂与仪器

3．1．1 实验试剂

3．1．2 实验仪器

3．2 实验方法

3．3 实验结果

3．3．1 100℃加热条件下GCG的降解产物

3．3．2 自来水体系中GCG的降解产物

3．3．3 GCG在PBS缓冲体系中的降解产物

3．3．4 GCG在Tris-HCl缓冲体系中的降解产物

3．4 实验结果分析与讨论

第四章 GCG稳定化方法研究

4．1 实验试剂与仪器

4．1．1 实验试剂

4．1．2 实验仪器

4．1．3 主要溶液的配制

4．2 实验方法

4．3 实验结果

4．3．1 纯水中GCG浓度与其稳定性的关系

4．3．2 自来水体系中GCG的稳定性

4．3．3 缓冲体系中GCG的稳定性

4．4 实验结果分析与讨论

4．4．1 GCG浓度与其稳定性的关系

4．4．2 自来水体系中GCG的稳定性

4．4．3 缓冲液体系中GCG的稳定性

全文总结

参考文献

附录

攻读硕士学位期间取得的科研成果

致谢