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水稻黑条矮缩病毒S8和S10基因序列分析和芋花叶病毒全基因组的测定

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摘要

黄淮海平原是我国重要的玉米产区。玉米粗缩病在黄淮海地区发生普遍,给黄淮海地区玉米安全生产造成了严重威胁。
   本研究用RT-PCR方法对山东、江苏、安徽等地采集的玉米、小麦和灰飞虱样品携带水稻黑条矮缩病毒(Rice black streaked dwarf virus,RBSDV)的情况进行了检测,测定并分析了部分分离物S8和S10的序列,以期明确山东RBSDV的来源,为玉米粗缩病的防治提供理论依据。
   获得了8个山东RBSDV分离物的S8序列和49个RBSDV分离物的S10序列。这些分离物的S8片段全长均为1936 bp,5’-非编码区(5’-UTR)为24 bp,3’-非编码区(3’-UTR)为136 bp,含有一个1776bp的开放阅读框(ORF),编码591个氨基酸(aa),与其他RBSDV分离物S8片段的核苷酸(nt)和aa序列一致率分别为96.3%-99.5%和99.4%-99.9%;S10片段全长1801bp,5’-UTR为21 bp,3’-UTR为103 bp,含有一个1678 bp的ORF,编码558个aa,与其他RBSDV分离物S10片段的nt一致率为93.4%-99.5%,aa一致率为
  98.4%-99.9%。在根据S10基因构建的系统进化树中,RBSDV分离物可以分为与地理和寄主来源无关的两个组,每组分离物均可再分为两个亚组。来自不同地区或寄主的RBSDV种群均处于负向(或纯化)选择。江苏和山东RBSDV分离物之间,以及山东小麦和玉米RBSDV分离物之间基因交流频繁。
   芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DsMV)是世界性分布的危害天南星科植物的重要病毒。本研究通过RT-PCR和5'-RACE的方法,克隆了泰安掌叶半夏DsMV分离物的全基因组序列。该序列全长为10030 nt,5’-UTR为165 nt,3’-UTR为250 nt,含有一个9612 nt的ORF,编码一个由3203 aa组成的多聚蛋白。该分离物与DsMV分离物M13(AJ298033)的nt和aa一致率分别为83.86%和96.53%。在根据CP基因构建的系统进化树中,41个DsMV分离物分成2个组,其中Ⅰ组有40个分离物,进一步分为ⅠA亚组、ⅠB亚组和ⅠC亚组;Ⅱ组只有一个分离物。本论文得到的分离物属于ⅠA亚组。

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