反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达

摘要

目的：反复自然流产(recurrent sporltaneous abortion，RSA)患者占育龄妇女的1％—2％，该病原因复杂且其中50％—70％没有明确的原因。早期的胚胎滋养细胞的生物学行为与恶性肿瘤相似，具有较高甚至比恶性肿瘤更高的侵袭性，与恶性肿瘤不同的是滋养细胞侵袭的深度是有限的，并受多种机制的严格调控。近年有观点认为早孕期滋养细胞侵袭的不足可导致流产或妊娠期高血压疾病，侵袭过渡又可导致妊娠滋养细胞的肿瘤。骨桥蛋白(osteoporltin，OPN)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)和其组织抑制因子(tissueinhibitors of metalloproteinase，TIMP)是早期滋养细胞侵袭的相关因素，本研究观察OPN在正常和RSA组患者妊娠绒毛和蜕膜组织中的表达和分布情况以及MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-3的表达情况，探讨侵袭性因素在RSA发病中可能的作用。 方法：选择来齐鲁医院计划生育科就诊的30例正常早孕和20例RSA患者，无菌条件下获取她们的妊娠绒毛和蜕膜组织，分别提取总RNA，RT-PCR技术检测绒毛组织中OPN、MMP-2和MMP-9 mRNA的表达量以及蜕膜组织中OPN、TIMP-1和TIMP-3 mRNA的表达量；将获取的新鲜绒毛和蜕膜组织用10％福尔马林固定，石蜡包埋，免疫组织化学染色的方法检测OPN蛋白在两组蜕膜和绒毛组织中的分布情况。 结果1、OPN mRNA在正常妊娠绒毛组织中随妊娠周数增加OPN mRNA表达的强度也不同，在早期妊娠中呈现先升高后下降的趋势。 2、OPN mRNA在RSA的绒毛和蜕膜组织中的表达均弱于正常妊娠组。分别为0.52±0.17和0.98±0.23(P<0.05)；1.14±0.2l和1.41±0.16(P<0.05)。3、两组的绒毛组织中OPN染色均呈阳性，但在两组染色的强度却有很大差异，在正常组，OPN蛋白在绒毛的内层具侵袭功能细胞滋养细胞中强阳性，而外层的具合成功能的合体滋养细胞中则未见表达，细胞滋养细胞和合体滋养均排列紧密，而RSA组患者的绒毛组织中OPN蛋白几乎不染色，细胞滋养细胞和合体滋养排列稀疏，两组平均光密度(0D)分别为101.12±13.61和32.59±10.43(P<0.01)。 4、正常妊娠的蜕膜组织中，OPN蛋白在腔上皮、腺上皮和蜕膜细胞中均呈现强阳性，而RSA组的蜕膜组织中OPN表达微弱，仅在腔上皮、蜕膜细胞及部分腺上皮中有着色，两组平均光密度(0D)分别为89.25±23.10和28.17±11.73(P<0.01)。 5、MMP-2、MMP-9在两组绒毛组织中均有表达，表达强度不同，MMP-2mRNA在正常妊娠组绒毛组织中的表达均强于RSA组，而MMP-9在两组中表达相似，其中MMP-2在正常和RSA组的平均相对表达量分别为5.43±0.36和2.53±0.29(P<0.05)，MMM-9mRNA分别为0.92±0.31和0.43±0.27(P>0.05)。 6、TIMP-1、TIMP-3 mRNA在两组蜕膜中均有表达，且RSA组均强于正常妊娠组，TIMP-1 mRNA在正常和RSA组蜕膜组织中的平均相对表达量分别为1.60±0.14和2.72±0.42(P<0.05)，TIMP-3 mRNA分别为0.67±0.18和1.47±0.21(P<0.05)，差异均有统计学意义。 结论人与猪、羊等家禽不同，在人绒毛和蜕膜组织中均有OPN mRNA的表达。正常妊娠早期绒毛组织中OPN mRNA的表达量先升高后降低，可能与绒毛中侵袭力强的细胞滋养细胞的数量有关。免疫组织化学染色OPN蛋白只分布在具侵袭力的细胞滋养细胞，而不分布在分泌功能的合体滋养细胞，进一步说明OPN可能与绒毛侵袭功能密切相关，且在正常妊娠的绒毛和蜕膜组织中染色强度均强于RSA组，表明RSA组绒毛的侵袭力减弱。正常妊娠绒毛组织中侵袭相关因素OPN、MMP-2mRNA的表达强于RSA组，而蜕膜组织中侵袭抑制性因素TIMP-1和TIMP-3 mRNA则是RSA组强于正常妊娠。所以，RSA组妊娠组织的侵袭力减弱而侵袭抑制力增强使绒毛植入子宫过浅、胎盘形成不良导致流产。

目录

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达中文摘要

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达英文摘要

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达符号说明

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达前言

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达材料和方法

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达结果

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达讨论

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达结论

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达附表

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达附图

第一部分反复自然流产患者妊娠组织中侵袭相关因素的表达参考文献

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达前言

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达摘要

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达英文摘要

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达英文符号说明

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达1.材料和方法

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达2 结果

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达附图

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达3 讨论

第二部分妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达参考文献

致谢

硕士研究生在读期间发表的文章