人唇腺中趋化性细胞因子CCL28的表达研究

摘要

趋化性细胞因子是细胞因子中的一种，该家族是一个小分子（8—16kDa）蛋白质的超家族，在氨基酸序列上存在20—70%的同源性。根据半胱氨酸的位置、排列方式及数量的不同，其被分为四类：CXC类（α）趋化性细胞因子、CC类（β）趋化性细胞因子、C类（γ）趋化性细胞因子、CXXXC类（δ）趋化性细胞因子。 CCL28是2000年发现的一种新的趋化性细胞因子，它属于上述分类中的CC类，曾被称为粘膜相关上皮趋化性细胞因子（MEC）。其可介导循环中的IgA抗体分泌细胞跨过血管壁向局部实体组织内迁徙。 口腔中的SIgA是口腔免疫防御机制中至关重要的因素之一，主要来自大、小涎腺，其中来自小涎腺的约占30—35%。Pan等人应用斑点杂交分析证明人体的多种组织中均表达CCL28，其中以结肠、气管、大涎腺、乳腺表达较丰富。人大涎腺表达的CCL28，一方面可介导IgA+ ASC由血循环向涎腺实体组织中迁徙，另一方面还可随唾液分泌到口腔中发挥杀菌抑菌作用。国内李潇的研究表明，在唾液中IgA的水平与CCL28的含量具有相关性。然而，迄今为止对人小涎腺中CCL28的表达和分泌情况尚无研究报道。因此，本课题的目的在于以唇腺组织为研究对象，从不同角度证实小涎腺中表达CCL28，从而为探讨小涎腺在维持口腔IgA水平方面的作用奠定基础。 方法： 1）应用实时荧光相对定量PCR技术来证实人的唇腺组织中表达CCL28 mRNA。 2）应用寡核苷酸探针原位杂交来检测唇腺组织中CCL28 mRNA的表达部位。 3）应用免疫组织化学来检测唇腺组织中CCL28蛋白的表达和分布情况。 结果： 1）实时荧光相对定量PCR结果表明健康成人的唇腺组织中表达丰富的CCL28mRNA。经统计学分析，其表达量（170．67±77．44）显著高于大肠对照组（19．50±14．55）（P<0．001）。其后的唇腺和腮腺CCL28表达比较表明，前者中的表达量（1．28±0．57）显著高于后者（0．79±0．24）（P<0．01）。 2）原位杂交显示CCL28 mRNA存在于腺泡上皮细胞胞浆中。 3）免疫组织化学显示唇腺腺泡上皮细胞胞浆、腺管上皮细胞、泡内粘液中均存在CCL28蛋白。但其染色深浅存在差异，这表明这几处CCL28蛋白的浓度不同。 结论： 同大涎腺一样，健康成人的唇腺中也表达丰富的CCL28，且其表达量高于腮腺。CCL28 mRNA表达于腺泡上皮细胞胞浆中，其翻译得到的蛋白质一部分在唇腺中发挥趋化作用，以吸引IgA+ ASC，从而使其分泌IgA；而另一部分则随唾液分泌到口腔中发挥抗菌抑菌作用。这为进一步探讨小涎腺在维持口腔SIgA水平中的作用奠定了基础。

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