OSTEON修复犬下颌骨缺损的实验研究

摘要

应用种植义齿修复缺失牙不仅可以为义齿提供理想、合理的支撑和固位，而且具有美观舒适、无须利用和磨切基牙等优点，特别对于某些不能耐受活动义齿修复及肿瘤手术后难以采用传统义齿修复方法的患者来说，种植义齿修复为他们提供了新的选择。但由于先天畸形、外伤、肿瘤、炎症等原因，常造成种植区骨量不足，限制了种植义齿的适用范围，是种植外科医师所面临的主要难题。人们相继应用多种植骨材料和技术来修复种植区骨缺损，恢复牙槽骨的高度和丰满度，以提高种植修复的远期成功率并获得理想的美学效果。
　　 目前广泛使用的骨移植材料有自体骨移植物、同种异体骨移植物、异种骨移植物及人工合成的骨替代物。这些材料均不同程度解决了骨缺损修复问题，但也各有利弊。自体骨移植存在延长手术时间，来源有限，创伤大等问题；同种异体骨及异种骨存在免疫排斥反应；人工合成的骨替代物不具有骨组织的生物学特性，仅有骨引导作用而不具有骨诱导作用，其骨生长机制仍然是爬行替代过程。目前临床上应用较为广泛的骨移植材料多为单纯某一种植骨材料或者是自体骨与某一种人工骨的混合材料，本实验中应用的材料为OSTEON和骨诱导活性材料（osteoinduction active material，OAM），两种材料均为复合材料。
　　 OSTEON是由羟基磷灰石（hydroxylapatite，HA）和β-磷酸三钙（β-tricalcium phosphate，β-TCP）复合而成，为疏松多孔结构，与人体松质骨极为相似，材料极富表面活性，具有良好的生物相容性和骨引导性，可高效引导骨组织再生。
　　 OAM由骨形成蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）与牛松质骨复合而成，具有良好的生物相容性，骨诱导性和良好骨传导作用，在充分发挥对BMP缓释作用的同时，又使载体获得良好的机械性能，可以有效引导骨组织再生。
　　 目的：
　　 OAM为国产材料，在我科室临床实践中已应用多年，临床效果较好，而OSTEON为韩国进口材料，在韩国己开展应用，而国内刚刚引进，尚未应用于临床。本实验应用OSTEON和OAM修复下颌骨骨缺损的动物实验，对比观察OSTEON修复骨缺损的效果，探讨OSTEON引导骨再生的方式和修复骨缺损的能力，为临床应用提供理论基础和实验依据。
　　 方法：
　　 1.动物模型的建立
　　 选用健康成年雄性杂种犬4只，分成两组，在其双侧下颌骨体部分别选择三个位点（1.0×1.25c㎡），分别随机植入OAM、OSTEON及不填入任何材料作为空白对照。
　　 2.取材
　　 取材前10天和前3天分别肌注盐酸四环素（25mg/kg），两组分别在术后三个月、六个月取材。
　　 3.制片
　　 梯度酒精脱水、甲基丙烯酸甲酯包埋，Leica-SP1600主锯式切片机垂直于标本长轴切片，选取中段切片，一部分直接封片进行荧光显微镜观察，另一部分做HE染色和甲苯胺蓝染色。
　　 4.观察
　　 动物一般情况观察、大体标本观察、X线观察、荧光显微镜观察四环素标记新骨形成情况，光学显微镜下观察HE染色和甲苯胺蓝染色切片的成骨情况，并选用不同倍数摄片。
　　 5.计算机图像分析
　　 选取每组标本中段切片2张，每张切片随机选择3个视野，在荧光显微镜下，求得荧光四环素标记率和骨矿化沉积率（MAR）。应用Metamorph Imaging System V4.6图像分析软件进行荧光四环素标记率、骨矿化沉积率的测算，应用SPSS13.0软件进行统计分析，对比实验组和对照组的各项指标有无统计学差异。
　　 结果：
　　 实验动物健康状态良好，创口均一期愈合；大体标本观察见各取材时间点OSTEON和OAM材料周边及孔隙内部均有不同程度的骨组织形成；体视显微镜下可清楚观察到孔隙内部有新骨组织长入；组织学观察可见骨组织的修复属于正常骨的修复过程；统计学分析显示术后3个月OSTEON的荧光四环素标记率和骨矿化沉积率均高于OAM，而二者又显著高于空白对照组，差别具有统计学意义（P<0.05，P<0.01），而术后6个月OSTEON与OAM的荧光四环素标记率和骨矿化沉积率均高于空白对照组，差别具有统计学意义（P<0.01），而二者之间无统计学差异（P>0.05）。
　　 结论：
　　 OSTEON能较好的修复骨缺损，在植骨3个月后，无论从新生骨量上还是成骨速度上都明显优于OAM。

目录

文摘

英文文摘

英文缩略语

前言

材料和设备

实验方法(附图表)

实验结果(附图表)

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述

参考文献

致谢

个人简历