Notch2 NRR蛋白的表达与纯化

摘要

Notch信号通路在动物的生长中具有很重要的作用，尤其是对动物的发育有很深的影响。研究表明Notch信号与多种疾病有密切的关系，特别是在肿瘤的形成和发展中，Notch信号通过不同的方式来影响肿瘤，因此Notch受体可以作为一个治疗癌症的靶点。
　　本论文通过构建一个包含Notch2负调节区NRR(文中简称NRR2)序列的载体，进而表达Notch2的负调节区蛋白，通过蛋白纯化的方法得到纯化的Notch2负调节区NRR蛋白，进而可以在体外测定其和目标化合物的亲和力，从而对潜在的天然配体进行大规模的初步筛选。
　　本论文中成功构建了带有六聚组氨酸标签的Notch2负调节区NRR序列的载体，并成功进行了蛋白表达，进过酶切、电泳以及序列测定等方法，确定得到的载体序列(大小为800bp)和蛋白(分子量为28KDa)都是正确的，进一步通过蛋白纯化的方法得到了纯度为85％的Notch2负调节区NRR蛋白。