关于人类精子自发顶体反应率与ART结局相关性关系研究

摘要

目的:本论文通过对人类精子进行自发顶体反应率的检测，并探讨精子自发顶体反应率与ART结局相关性关系的前瞻性研究，包括自发顶体反应率与AI结局（夫精IUI妊娠率、供精ICI妊娠率）、IVF结局（夫精IVF受精率、供精IVF受精率）的相关性关系探讨，期待确定精子自发顶体反应的检测是否具有真正意义的临床预测性，建立一套自发顶体反应检测的评估体系，通过评估精子自发顶体反应率，提高预测样本生育力的准确性，为进行ART治疗的夫妇在选择正确的治疗方案提供一定的临床指导意义。
　　方法:选取我院接受AI（夫精IUI、供精ICI）、 IVF(夫精IVF、供精IVF)治疗的不孕夫妇，其夫精精液、供精精液经精液制备处理后，取微量精液通过FITC-PSA荧光染色，×400荧光显微镜下至少计数200个精子分别检测自发顶体反应率。随后根据分别符合夫精IUI、供精ICI、夫精IVF、供精IVF治疗指征的不孕不育夫妇临床病例资料选择纳入研究的对象组，使用统计软件SPSS16.0对精子自发顶体反应率与精液各参数、ART临床结局进行相关性分析，使用ROC曲线分析筛选出各研究对象组中对临床治疗方案选择有指导意义的最佳阈值，期待建立一套自发顶体反应检测的参考值体系。本研究已申报伦理审查并已获伦理委员会批准，批件号: LL-SC-SG-2013-014。
　　结果:(1)接受夫精IUI治疗的不孕不育夫妇，夫精精子自发顶体反应率与精液处理前后密度、精液处理前后(C+D)级精子数正相关，与精液处理前后活率负相关。(2)接受夫精IVF治疗的不孕不育夫妇，ROC曲线分析筛选出诊断低受精率(IVF卵母细胞受精率＜50％)的夫精精子自发顶体反应率的最佳阈值为4.4％，夫精精子自发顶体反应率与精子正常形态率、精液处理前密度、精液处理前活率、精液处理前前向运动精子百分率、精液处理前后A级精子百分率、精液处理前B级精子百分率负相关，精液处理前C级精子百分率、精液处理前D级精子百分率正相关。(3)接受供精IVF治疗的不孕不育夫妇，供精精子经双层密度梯度离心制备处理后，ROC曲线分析筛选出诊断低受精率的供精精子自发顶体反应率的最佳阈值为17.62％，自发顶体反应率与精液处理后密度、IVF受精率负相关;供精精子经微量密度梯度离心制备处理后，ROC曲线分析筛选出诊断低受精率的供精精子自发顶体反应率的最佳阈值为25.36％，自发顶体反应率(按＜25.36，≥25.36)进行分组，两组间IVF受精率有显著性差异。(4)接受供精ICI治疗的不孕不育夫妇，精子自发顶体反应率与冷冻复苏率正相关。(5)精液经上游法制备处理后检测的自发顶体反应率显著低于双层密度梯度离心。
　　结论:(1)对接受夫精IUI、供精ICI治疗的不孕不育夫妇，精子自发顶体反应率对临床妊娠的预测价值仍需进一步研究验证。(2)对夫精IVF、供精IVF治疗的不孕不育夫妇，虽然ROC曲线分析给出cut-off值，但两组间IVF受精率均大于70％，对决定临床治疗方案指导意义不大。(3)不同的精液制备方法、冷冻损伤对精子自发顶体反应率有一定影响。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

实验技术路线图

前言

第一部分：上游法与双层密度梯度离心对精子自发顶体反应率检测的影响比较

1 实验材料和实验方法

1．1 主要仪器设备

1．2 主要实验试剂

1．3 研究对象

1．4 实验方法

2 结果

2．1 ×400荧光显微镜下精子自发顶体反应辨别标准

2．2 举例说明不同精液标本×400荧光显微镜下FITC-PSA荧光染色图片

2．3 数据统计结果

3 讨论

4 结论

第二部分：人类精子自发顶体反应率与夫精IUI结局的相关性关系探讨

1 实验材料和实验方法

1．1 主要仪器设备

1．2 主要实验试剂

1．3 研究对象

1．4 实验方法

2 数据统计结果

3 讨论

4 结论

第三部分：人类精子白发顶体反应率与供精ICI结局的相关性关系探讨

1 实验材料和实验方法

1．1 主要仪器设备

1．2 主要实验试剂

1．3 研究对象

1．4 实验方法

2 结果

2．1 精子自发AR率频数分布

2．2 妊娠组及非妊娠组间各参数比较

2．3 精子自发AR率与各参数的相关性分析

3 讨论

4 结论

第四部分：人类精子自发顶体反应率与夫精IVF结局的相关性关系探讨

1 实验材料和实验方法

1．1 主要仪器设备

1．2 主要实验试剂

1．3 研究对象

1．4 实验方法

2 结果

2．1 精子自发AR率频数分布

2．2 ROC曲线分析筛选低受精率诊断最佳阈值

2．3 精子自发AR率与精液各参数相关性分析

2．4 精子自发AR率与夫精IVF结局相关性分析

3 讨论

4 结论

第五部分：人类精子自发顶体反应率与供精IVF结局的相关性关系探讨

1 实验材料和实验方法

1．1 主要仪器设备

1．2 主要实验试剂

1．3 研究对象

1．4 实验方法

2 结果

2．1 不同精液制备方法精子自发AR率频数分布

2．2 ROC曲线分析筛选低受精率诊断量佳阈值

2．3 精子自发AR率与精液参数、IVF结局的相关性

3 讨论

4 结论

参考文献

综述 人类精子顶体反应检测及临床意义的研究进展

致谢