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芯片上的三维细胞培养模型构建及其应用研究

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1 绪论

1.1 引言

1.2 三维细胞培养系统概述

1.2.1 三维细胞培养模型

1.2.2 三维细胞培养技术

1.2.3 三维细胞培养的应用

1.3 基于微流控芯片技术的三维细胞培养研究

1.3.1 微流控芯片用于细胞培养

1.3.2 微流控芯片用于三维细胞培养

1.3.3 从三维细胞培养到器官芯片(organ-on-a-chip)

1.4 心肌组织工程概述

1.4.1 心肌组织工程材料

1.4.2 种子细胞

1.5 本文主要工作

2 伤口芯片:基于一种新型SU-8网格芯片的高通量三维伤口愈合实验研究

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 实验试剂和仪器

2.2.2 芯片制作

2.2.3 细胞培养

2.2.4 细胞进样

2.2.5 细胞活性检测

2.2.6 候选药物刺激实验

2.2.7 扫描电镜表征

2.2.8 三维细胞团增殖监控

2.2.9 二维细胞迁移对比实验

2.2.10 SU-8芯片厚度表征

2.2.11 数据统计和分析

2.3 结果与讨论

2.3.1 可控芯片结构的表征

2.3.2 细胞接种于芯片

2.3.3 细胞在芯片结构中的生长过程

2.3.4 追踪不同细胞在不同芯片结构的生长

2.3.5 候选药物对伤口愈合影响研究

2.4 本章小结

3 高通量三维中空细胞球体培养系统用于芯片上血管新生研究

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 实验试剂和仪器

3.2.2 芯片制作及成像

3.2.3 细胞培养、进样以及芯片中培养

3.2.4 制作胶原蛋白水凝胶

3.2.5 胶原蛋白中细胞表征

3.2.6 细胞活性表征

3.2.7 芯片上血管新生实验

3.2.8 芯片上单层细胞对比实验

3.2.9 血管新生记录及统计

3.3 结果与讨论

3.3.1 芯片结构与细胞位置表征

3.3.2 芯片中培养的内皮细胞团

3.3.3 内皮细胞球嵌入胶原蛋白

3.3.4 HUVECs在芯片中的活性

3.3.5 单层内皮细胞和内皮细胞球体血管新生对比

3.3.6 不同VEGF刺激下HUVEC细胞球血管新生监控和对比

3.4 本章小结

4 部分还原氧化石墨烯泡沫芯片用于体外构建心肌组织

4.1 引言

4.2 实验部分

4.2.2 制备氧化石墨烯(GO)溶液

4.2.3 制作三维部分还原氧化石墨烯(PRGO)泡沫芯片

4.2.4 原代心肌细胞的分离、接种以及三维培养

4.2.5 部分还原氧化石墨烯泡沫(PRGO)结构以及性质表征

4.2.6 原代心肌细胞活性检测

4.2.7 原代心肌细胞贴壁状态表征

4.2.8 原代心肌细胞在PRGO泡沫芯片中的增殖、组织以及跳动表征

4.2.9 心肌细胞面积统计与对比

4.3 结果与讨论

4.3.1 PRGO芯片制作流程

4.3.2 通过泡沫镍还原获得的PRGO泡沫芯片结构和性质

4.3.3 原代心肌细胞贴壁并铺展于PRGO泡沫芯片表面

4.3.4 原代心肌细胞在PRGO泡沫芯片中增殖以及三维生长

4.3.5 原代心肌细胞在PRGO泡沫芯片中活性以及细胞跳动表征

4.4 本章小结

5 二氧化硅-生物复合材料血管芯片用于组装体外三维多层血管网络

5.1 引言

5.2 实验部分

5.2.1 实验试剂和仪器

5.2.2 实验动物管状组织去细胞化

5.2.3 脱细胞组织硅化处理

5.2.4 复合材料结构表征

5.2.5 复合材料渗透性表征

5.2.6 细胞培养及染色

5.2.7 单层细胞组装

5.2.8 PDMS材料对比实验

5.2.9 HUVEC细胞在复合材料以及PDMS材料贴壁对比

5.2.10 VEGF诱导血管新生及其成像

5.2.11 双层细胞组装及成像

5.3 结果与讨论

5.3.1 血管芯片骨架的结构表征

5.3.2 血管芯片材料的渗透性表征

5.3.3 组装一层HUVEC于血管芯片

5.3.4 HUVEC细胞组装效率及贴壁培养

5.3.5 HUVEC在PDMS表面组装对比

5.3.6 VEGF诱导基于血管芯片的血管新生

5.3.7 双层血管细胞组装探讨

5.4 本章小结

6 结论与展望

6.1 本文研究内容与结论

6.2 论文的主要创新点

6.3 论文的不足与展望

致谢

参考文献

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