不明原因反复自然流产患者外周血中CD94、CD56、IL-15含量变化及其相关性研究

摘要

目的：免疫学研究认为，妊娠是一种同种异体移植现象，流产是移植物被排斥的结果。在正常妊娠过程中，胚胎作为一种半同种异体组织抗原却不受母体排斥而存活，这与母体内的免疫微环境保持平衡有着很大的关系。反复自然流产(recurrentspontaneousabortion，RSA)是妊娠期常见并发症，其发生率约占妊娠总数的1.0％，占自然流产数的15％。RSA的病因涉及遗传基因缺陷、母体的全身性疾病、生殖器官畸形、内分泌功能失调、胎盘功能不足、感染及胚胎畸形等因素，但40-60％原因不明，称为不明原因反复自然流产(unexplainedRSA，uRSA)。近年来的研究表明，人类自然杀伤细胞(Naturalkillercell，NK)在机体的免疫调控中起重要作用，NK细胞功能失衡与RSA关系密切。本课题旨在研究原因不明RSA患者外周血中NK细胞表面抗原标志CD94、CD56和NK细胞调节因子IL-15的含量变化及其相关性，探讨CD94、CD56和IL-15在原因不明RSA发病中的作用。 方法：资料来源：选自在河北医科大学第二医院妇产科门诊和计划生育实验室就诊患者。RSA组：30例，自然流产次数≥3次，排除染色体、解剖、内分泌异常、感染及自身免疫性疾病，所有病例均于门诊就诊时抽取外周静脉血。RSA已孕组：15例，既往有过2次及以上的自然流产史，并且本次妊娠已经确诊为胚胎停育或难免流产。于清宫手术前抽取外周静脉血。正常妊娠组：15例，为孕37-57天要求人工流产术的正常妊娠妇女，既往无不良孕产史及上述疾病史，人流前均做B超证实为宫内孕单活胎，无任何流产迹象，于清宫手术前抽取外周静脉血。正常非孕组：15例，为要求放置宫内节育器的正常非妊娠妇女，既往均有正常分娩史，无自然流产史、死胎或死产史，也无上述疾病史，于上环前抽取外周静脉血。各组均抽取前臂肘静脉血4ml，其中2ml置于含有EDTAK2抗凝剂的无菌试管中，8小时内送流式检测；其余2ml置于无菌不含抗凝剂的试管中，室温下待其自然凝固，2000转/分，离心10分钟，取上层血清置于另一个试管中，置-20℃冰箱待测。采用流式细胞分析方法检测四组研究对象外周血中CD94、CD56阳性细胞占淋巴细胞总数的百分数，CD56阳性细胞中CD56bright、CD56dim所占百分数。流式上机分析采用Cellquest软件每个标本摄取10000个细胞，以FSC/SSC设门，圈定淋巴细胞群进行分析，结果由该软件自动统计。采用酶联免疫吸附实验检测四组研究对象血清中IL-15的含量。由全自动酶标仪在450nm处读出OD值，酶标仪可自动将OD值转换为浓度。 结果：1.RSA未孕组外周血中CD94的水平(21.72±6.73)％较正常非孕组妇女(26.06±2.50)％有明显降低(P＜0.05)。CD56和IL-15的水平分别为(24.93±5.96)％和(86.48±28.89)pg/ml，高于正常非孕组(17.50±2.44)％、(60.01±20.26)pg/ml(P＜0.05)。CD56bright和CD56dim的水平与正常非孕组比较，差异无显著性(P＞0.05)。2.RSA已孕组外周血中CD94水平(21.30±3.38)％和CD56bright水平(64.63±11.28)％比正常妊娠组(26.97±3.23)％和(74.65±5.12)％低(P＜0.05)。CD56、CD56dim和IL-15的水平(25.81±4.92)％、(36.03±11.10)％和(104.27±24.73)pg/ml，比正常妊娠组(21.23±3.17)％、(25.35±5.12)％和(70.44±26.99)pg/ml高(P＜0.05)。3.正常妊娠组外周血中CD56的水平(21.23±3.17)％和CD56dim的水平(25.35±5.12)％较正常非孕组的(17.50±2.44)％和(18.06±3.51)％显著升高(P＜0.05)。CD56bright的水平(74.65±5.12)％较正常非孕组的(81.94±3.51)％显著降低(P＜0.01)。CD94和IL-15的水平与正常非孕组比较，差异无显著性(P＞0.05)。4.直线相关分析：RSA未孕组外周血中CD94与CD56和CD56bright呈正相关，与CD56dim呈负相关P＜0.05。 结论：正常妊娠时外周血中CD56+细胞增多，其中CD56dim细胞增多而CD56bright细胞减少，这可能提示妊娠时胚胎需要CD56dim细胞为其扫清障碍。原因不明RSA患者外周血中CD56dim和IL-15的表达升高，CD94和CD56bright的表达降低与RSA的发病有关。RSA未孕组患者外周静脉血中CD94与CD56和CD56bright呈正相关，与CD56dim呈负相关，说明CD94与CD56bright细胞有协同作用而与CD56dim细胞作用相反。因此，IL-15、CD94、CD56bright和CD56dim可能在RSA的发病机制中起一定作用，可以作为流产的预测信号指标。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 自然杀伤细胞与反复自然流产

致谢

个人简历