河北省两种和湖南省一种淡水刺胞动物的分类研究

摘要

刺胞动物门(Cnidaria)是高等多细胞动物演化的一个起点。刺胞动物分类学研究已成为无脊椎动物分类学研究热点之一。本研究首次采集到滹沱河流域两种淡水刺胞动物:索氏桃花水母CraspedacustasowerbyiLankester，1880和普通水螅HydravulgarisPallas，1766。并在湖南师范大学采集到索氏桃花水母C.sowerbyi的样本。通过DNA条形码技术(DNABarcoding)并结合形态分类对其进行了分类鉴定，其结果如下:
　　1.发现河北省桃花水母属—新纪录种索氏桃花水母C.sowerbyi。形态学观察初步确定其分类地位，通用引物扩增河北省索氏桃花水母C.sowerbyi核糖体小亚基(18SrRNA)和内部转录间隔区(rDNAITS)序列，利用MEGA5.0分别构建系统树并分析其遗传距离，显示其与C.sowerbyi聚为一类，遗传距离最小值分别为0和0.029，相似度最大值均为100％。
　　2.发现河北省水螅属—新纪录种普通水螅H.vulgaris。通用引物扩增河北省普通水螅H.vulgaris核糖体ITS序列和线粒体COI序列，分别构建其11和18个种群系统树，分析其遗传距离。前者显示与H.vulgaris遗传距离较近为0.003，后者与H.vlgaris较近为0.007。与形态学观察一致。
　　3.发现湖南省桃花水母属索氏桃花水母C.sowerbyi—新分布。通用引物扩增湖南省产索氏桃花水母C.sowerbyi核糖体ITS序列和线粒体COI序列，rDNAITS序列分析其与河北省产索氏桃花水母遗传距离最小为0.016，mtDNACOI序列分析其与索氏桃花水母C.sowerbyi相似度达97％，共计19个多态位点，均为转换。

目录

声明

摘要

第一章 论文综述

1．1 刺胞动物的分类学研究

1．2 淡水刺胞动物的分类学研究

1．2．1 淡水水母类的分类学研究

1．2．2 淡水水螅类的分类学研究

1．2．3 淡水棒螅类的分类学研究

1．3 我国淡水产刺胞动物的分布特征

1．4 发展和问题

第二章 河北省淡水水母的分类鉴定

2．1 实验材料

2．1．1 河北省淡水水母的调查地点

2．1．2 水母标本的采集和保存

2．2 实验试剂

2．2．1 实验试剂

2．2．2 试剂配制

2．3 实验仪器

2．4 实验方法

2．4．1 光镜下水母标本的形态研究

2．4．2 淡水水母DNA的提取

2．4．3 核基因ITS序列和18S序列的扩增

2．4．5 琼脂糖凝胶电泳

2．4．6 PCR产物的胶回收

2．4．6 克隆测序

2．5 实验结果

2．5．1 索氏桃花水母的形态观察和测量参数统计

2．5．2 索氏桃花水母18S rRNA序列的PCR扩增

2．5．2 索氏桃花水母18S rRNA序列分析和系统树构建

2．5．3 索氏桃花水母rDNA ITS序列的PCR扩增

2．5．4 索氏桃花水母rDNA ITS序列分析和系统树构建

第三章 河北省淡水水螅的分类鉴定

3．1 实验材料

3．1．1 河北省淡水水螅的调查地点

3．1．2 水螅标本的采集和保存

3．2 实验试剂和实验仪器

3．3 实验方法

3．3．1 光镜下水螅标本的形态研究

3．3．2 淡水水螅DNA的提取

3．3．3 核基因ITS序列和线粒体COI序列的扩增

3．3．5 琼脂糖凝胶电泳

3．3．6 PCR产物的胶回收

3．3．6 克隆测序

3．4 实验结果

3．4．1 普通水螅的形态图和测量参数统计

3．4．2 普通水螅rDNA ITS序列的PCR扩增

3．4．3 普通水螅rDNA ITS序列分析和系统树构建

3．4．4 普通水螅mtDNA COI序列的PCR扩增

3．4．5 普通水螅mtDNA COI序列分析和系统树构建

第四章 湖南省淡水水母的分类鉴定

4．1 实验材料

4．1．1 湖南省淡水水母的调查地点

4．1．2 湖南省淡水水母标本的采集和保存

4．2 实验试剂、仪器和方法

4．3 结果与分析

4．3．1 湖南省索氏桃花水母的形态观察和测量参数统计

4．3．2 湖南省索氏桃花水母rDNA ITS序列的PCR扩增

4．3．3 湖南省索氏桃花水母rDNA ITS序列分析和系统树构建

4．3．4 湖南省索氏桃花水母mtDNA COI序列的PCR扩增

4．3．5 湖南省索氏桃花水母mtDNA COI序列分析和系统树构建

第五章 讨论

5．1 桃花水母的形态差异

5．2 桃花水母的地理分布

5．3 DNA条形码技术在淡水刺胞动物分类中的应用

结论

参考文献

致谢