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摘要
第一章前言
1．1丝状真菌表达系统
1．1．1丝状真菌遗传转化系统
1．1．2丝状真菌筛选标记
1．2丝状真菌蛋白分泌途径
1．2．1真菌蛋白分泌系统
1．2．2提高生物质降解酶分泌表达的策略
1．3膜蛋白在丝状真菌生物质降解酶合成调控中的作用
1．3．1 MFS超家族蛋白在丝状真菌生物质降解酶合成调控中的作用
1．3．2纤维寡糖转运蛋白在丝状真菌生物质降解酶合成调控中的作用
1．4课题的目的和意义
2．1．1菌种和质粒
2．1．2酶和化学试剂及主要仪器
2．1．3所用培养基与微量试剂
2．2实验方法
2．2．1候选基因敲除盒构建
2．2．2丝状真菌原生质体制备
2．2．3原生质体转化实验
2．2．4pyrG缺失菌株原生质体转化实验
2．2．5转化菌株的单孢分离
2．2．6真菌总DNA提取
2．2．7真菌总蛋白提取
2．2．8纤维素酶活测定
2．2．9淀粉酶活测定
2．2．10草酸青霉菌株的培养
2．2．12定量RT-PCR
第三章结果与分析
3．1草酸青霉可重复利用筛选标记的转化系统构建
3．1．1反向筛选标记的构建
3．1．2利用反向筛选标记pyrG删除草酸青霉菌株中幻忍基因
3．1．3突变菌株Δku70Δkan和 Δku70ΔR-pyrG的表型特征
3．1．4小结
3．2草酸青霉纤维素酶合成相关的膜蛋白鉴定及其功能研究
3．2．1与纤维素酶合成相关的膜蛋白筛选、鉴定
3．2．2与纤维紊酶合成相关的膜蛋白的系统进化分析
3．2．3候选基因缺失突变株的构建
3．2．4候选基因缺失突变菌株表型
3．2．5候选基因敲除对突变株蛋白分泌的影响
3．2．6候选基因敲除对胞外纤维素酶的影响
3．2．7候选基因敲除对胞外淀粉酶活力的影响
3．2．8敲除POX06051基因对纤维素酶基因转录水平的影响
3．2．9小结
参考文献
附录
致谢
硕士研究生期间论文发表情况
