猪圆环病毒2型疫苗不同免疫方法的效果比较研究

摘要

猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus2, PCV2）是一种对养猪业造成严重损失的传染性病毒，是断奶仔猪多系统衰竭综（Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS）的主要病原。PCV2还与猪皮炎肾病综合征、猪免疫缺陷综合征、猪呼吸道病综合征、猪腹泻综合征、猪中枢神经系统综合征等传染性疾病的发生相关。PCV2在世界范围内普遍存在，其引起的一系列疾病主要发生于6～16周龄的断奶仔猪，临床症状主要表现为：断奶仔猪食欲减少或废绝，猪只进行性消瘦，呼吸困难、腹泻、贫血，有时出现皮肤苍白或黄疸，发育迟缓，体重减轻。生长育肥猪皮肤发生圆形或不规则形的隆起，呈现周边为红色或紫色中央为黑色的病灶。目前对PCV2引起的疾病以预防为主治疗为辅，市面上流通的全病毒灭活苗、重组嵌合苗、亚单位疫苗在预防 PCV2感染中发挥了重要作用。但是进口亚单位疫苗价格昂贵，国产灭活疫苗效果仍不够理想，选择一种价格合理效果确切的新型疫苗就显得非常迫切。本论文选择大肠杆菌表达系统生产的亚单位圆环疫苗为原材料，于广东省惠州市一规模场进行该疫苗免疫效力试验并与猪场原使用疫苗进行了比较实验，寻求有利于猪场预防圆环病毒的疫苗，主要安排如下：
　　1、疫苗免疫前对该试验猪场进行了免疫背景和疫病流行背景的调查和监测。该猪场正常免疫免疫圆环疫苗和蓝耳疫苗，圆环疫苗使用的是国产某公司生产圆环灭活疫苗，其生产成绩一般。
　　2、免疫大肠杆菌表达的基因工程圆环疫苗和猪场正使用的圆环疫苗后对实验猪的临床反应、生长速度、健康状况进行了观察、结果表明圆环疫苗免疫组生产成绩明显好于对照不免疫圆环疫苗组，4个免疫疫苗组之间B组表现出最好的生产成绩，整个阶段存活率94.3%，175d出栏平均体重120.65kg。猪场现用疫苗组（D组）生产成绩最差，整个阶段存活率84.2%，175d出栏平均体重117.94kg。
　　3、采用ELISA方法对实验猪进行血清抗体水平监测。免疫14天后，抗体阳性格率75%-100%之间，其中猪场现在使用疫苗抗体阳性率最低（90%）；A、B、C这3个试验组免疫后圆环病毒抗体100%阳性，可持续至少4个月。
　　4、采用荧光定量PCR方法对血清中PCV2和PRRSV感染情况进行了监测，结果显示试验免疫组（A、B、C、D组）PCV2、PRRSV感染比例明显小于不免疫圆环疫苗组（E组），说明免疫圆环疫苗能在一定程度上提高猪只抗PRRSV感染的能力；但试验免疫组（A、B、C、D组）之间PCV2、PRRSV感染比例差别不明显。

目录

声明

缩略语及英汉对照表

1 前言

1.1 病原学

1.1.1 猪圆环病毒的发现

1.1.2 猪圆环病毒的分类

1.1.3 猪圆环病毒的理化特性

1.1.4猪圆环病毒的培养特性

1.2 猪圆环病毒分子生物学特征

1.2.1 猪圆环病毒基因结构

1.2.2 猪圆环病毒基因组编码相关蛋白

1.3 流行病学

1.4 猪圆环病毒引起的相关疾病

1.4.1 先天性震颤（CT）

1.4.2 断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）

1.4.3 猪皮炎肾病综合征（PDNS）

1.4.4 猪呼吸道综合征（PRDC）

1.4.5 猪繁殖障碍性疾病

1.4.6 肠炎

1.5 猪圆环病毒的致病机理

1.5.1 免疫刺激

1.5.2 免疫抑制

1.6 猪圆环病毒疫苗的研究进展

1.6.1 PCV2灭活疫苗

1.6.2 PCV2弱毒活疫苗

1.6.3 PCV2基因工程疫苗

1.6.4 其他种类疫苗

1.7 猪圆环病毒病的防治

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 试验猪场和实验疫苗

2.1.2 主要试剂

2.1.2主要仪器设备

2.2 试验方法

2.2.1 免疫方案

2.2.2 试验样品处理

2.2.3 血清抗体检测

2.2.4 病毒载量测定

2.2.5 生长速率的统计

2.3 试验结果和分析

2.3.1 疫苗免疫前后圆环抗体水平的变化

2.3.2 疫苗免疫过后圆环抗体阳性率

2.3.3疫苗免疫过后存活率统计

2.3.4疫苗免疫过后圆环病毒感染统计

2.3.5疫苗免疫过后蓝耳病病毒感染情况

2.3.6 疫苗免疫过后猪只生长速率

2.3.7 圆环疫苗免疫后经济效益分析

3 讨论

4 结论

致谢

参考文献