人胚胎干细胞抗肿瘤作用的体外初步研究

摘要

目的：
　　1.研究体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌HepG2细胞的抑制作用。
　　2.研究人胚胎干细胞 H9与乳腺癌细胞共培养上清液对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外抑制作用。
　　方法：
　　1.建立人胚胎干细胞(H9)与肝癌 HepG2细胞共培养体系,显微镜下观察胚胎干细胞对肿瘤细胞生物学行为的影响，流式细胞仪检测HepG2细胞对肿瘤细胞的凋亡与周期的影响。
　　2.建立人胚胎干细胞(H9)与乳腺癌MDA-MB-231细胞接触式共培养体系，收集共培养上清液。以单独培养的H9细胞上清为对照，显微镜下观察共培养上清液对肿瘤细胞生物行为学的影响，用MTT法检测上清液对MDA-MB-231细胞增殖的影响，Hoechst染色及流式细胞术检测上清液对肿瘤细胞的凋亡影响；Transwell小室法检测上清液对肿瘤细胞侵袭和迁移的影响。
　　结果：
　　1.共培养过程中，肝癌 HepG2细胞生长受到抑制，随共培养时间延长，细胞数量逐渐减少，出现老化或凋亡迹象；流式细胞术检测发现HepG2细胞凋亡率显著增加，细胞周期被阻滞于G0/G1期。
　　2.人胚胎干细胞(H9)与乳腺癌 MDA-MB-231共培养上清液处理后的乳腺癌 MDA-MB-231细胞形态学发生变化，出现凋亡迹象；Hoechst33258染色后荧光显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态学改变，表现为核缩小、核碎裂等；细胞凋亡率升高，细胞生存率和细胞侵袭、迁移能力均降低，而对照组MDA-MB-231细胞几乎没有受到影响。
　　结论：
　　体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌HepG2细胞有一定抑制作用；人胚胎干细胞H9与人乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养的上清液对MDA-MB-231有一定的体外抑癌效应。综上所述，人胚胎干细胞一定条件下在体外对肿瘤细胞有某种程度的抑制作用。

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前言

参考文献

第一部分 人胚胎干细胞与肝癌细胞共培养现象的初步观察

1材料

2方法

3结果

4讨论

参考文献

第二部分 乳腺癌细胞-干细胞共培养上清液对乳腺癌细胞的体外抗肿瘤作用研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

参考文献

全文总结

附图

文献综述: 人胚胎干细胞研究综述

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章