声明
英汉缩略语名词对照
前言
1 材料与方法
1.1动物及细胞系
1.2实验仪器和材料
1.3主要实验试剂和试剂配制
1.3.1实验试剂
1.3.2试剂配制
1.4实验方法
1.4.1 BMSCs分离及培养
1.4.2流式细胞术检测BMSCs表面分子表达
1.4.3间接共培养建立
1.4.4不同时间条件下共培养BMSCs中NF-kB表达改变
1.4.5 ELISA检测BMSCs及共培养细胞上清中TNF-α的表达
1.4.6 RT-QPCR检测TNF-α在BMSCs及共培养细胞中mRNA水平表达
1.4.7不同浓度的TNF-α重组蛋白对共培养BMSCs中NF-kB表达影响
1.4.8实验分组
1.4.9倒置显微镜观察各组形态变化
1.4.10 CCK8检测细胞活力
1.4.11流式细胞术检测细胞周期
1.4.12 Transwell检测细胞迁移能力
1.4.13RT-QPCR检测Caspase3、Caspase8、c-Myc、CyclinD1、TNFR1 mRNA水平的表达
1.4.14Western blot检测NF-κB/P65、CyclinD1、c-Myc、CleavedCaspase3、p-Bad、P62、LC3II/LC3I蛋白表达
1.4.15统计学分析
2 结果
2.1 BMSCs表面抗原表达
2.2不同时间条件下共培养BMSCs中NF-kB表达改变
2.3 BMSCs及共培养细胞TNF-α表达改变
2.4不同浓度的TNF-α重组蛋白对共培养BMSCs中NF-kB表达影响
2.5细胞形态的变化
2.6 CCK8检测细胞活力
2.7流式细胞术检测细胞周期
2.8 Transwell检测细胞迁移能力
2.9 RT-QPCR检测Caspase3、Caspase8、c-Myc、CyclinD1、TNFR1 mRNA水平的表达
2.10Western blot检测各组NF-κB/P65、cyclinD1、c-Myc、Cleaved Caspase3、p-Bad、LC3、P62蛋白表达
3 讨论
全文总结
一、结论
二、创新性与意义
三、局限性与展望
参考文献
文献综述:TNF-α与肿瘤研究进展
致谢
攻读学位期间已发表的论文及参加的重要学术会议
