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【6h】

m6A去甲基化酶FTO在砷诱发多巴胺能神经传导障碍中的调控作用

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前言

参考文献

第一部分 慢性饮水砷暴露对小鼠皮层多巴胺能神经传导的影响

1.1 实验仪器

1.2 实验试剂

1.3 主要试剂配制

2 实验方法

2.1 建立亚砷酸钠染毒动物模型

2.2 行为学实验

2.3原子荧光光谱法

2.4 高效液相色谱-荧光检测法

2.5 透射电镜下皮层超微结构观察及突触参数分析

2.6 尼氏染色

2.7 Western-blot

2.8 统计学分析

3 实验结果

3.1慢性饮水砷暴露对小鼠体重的影响

3.2 慢性饮水砷暴露对小鼠神经行为功能的影响

3.3慢性饮水砷暴露后对小鼠大脑皮层砷和多巴胺浓度的影响

3.4 慢性饮水砷暴露对皮层组织病理学及突触超微结构的影响

3.5 慢性饮水砷暴露对小鼠皮层多巴胺能神经传导的影响

4 讨论

参考文献

第二部分 FTO在砷诱发的多巴胺能神经传导障碍中的作用

1.1实验仪器

1.2 实验试剂

2 实验方法

2.1 组织中FTO蛋白检测

2.2 组织切片免疫荧光

2.3 细胞培养

2.4 细胞活性检测(Cell counting kit-8,CCK-8)

2.5 细胞内多巴胺含量的检测

2.6 Western blot检测细胞内FTO、TH、DAT、COMT的蛋白表达

2.7总RNA提取

2.8 斑点杂交

2.9 细胞荧光

2.10 FTO siRNA和FTO CRISPRa转染

2.11 统计学分析

3 实验结果

3.1体外模型验证砷能诱发多巴胺能神经传导障碍

3.2砷暴露后对皮层组织、PC-12细胞中m6A修饰的影响

3.3 砷暴露对皮层组织、PC-12细胞中FTO蛋白表达的影响

3.4 FTO对m6A修饰水平的影响

3.5 FTO对多巴胺能神经传导的调控作用

4 讨论

参考文献

文献综述:亚砷酸钠致神经毒性机制研究现状

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的论文

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