抗细胞分裂周期蛋白25B(CDC25B)自身抗体ELISA试剂盒的制备及在食管鳞状细胞癌患者中的应用

摘要

研究背景及研究目的：
　　 细胞分裂周期蛋白25B (CDC25B）是CDC25磷酸酶家族中的一员，它在肿瘤细胞的生长中起了重要的作用。最近的研究表明，食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体水平明显高于正常人以及其它类型的肿瘤；然而抗CDC25B自身抗体诊断及预后的价值还不是很清楚。本文的研究目的是用自行制备的反向捕获酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体并探讨食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体的临床意义。
　　 研究方法：
　　 裂解食管鳞癌细胞株Eca-109并纯化蛋白用于自行制备ELISA试剂盒。利用试剂盒进行反向捕获酶联免疫吸附试验（ELISA）检测134例原发性食管鳞状细胞癌患者和134例正常人血清中的抗CDC25B自身抗体。并将食管鳞状细胞癌患者血清中的抗CDC25B自身抗体水平与其它肿瘤标记物癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞癌相关抗原（SCC-Ag）进行比较。
　　 研究结果：
　　 使用Eca-109细胞裂解物提纯抗原，制备反向捕获ELISA试剂盒，可用于检测食管鳞癌患者血清中的抗CDC25B自身抗体。食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体的水平(A450=0.9173±0.4729)明显高于正常人(A450=0.3775±0.2618，P<0.01)，其接收器工作性能曲线（ROC）下面积为0.870（95％置信区间：0.835-0.920）。当选取A450为0.7254作为临界值时，敏感性和特异性分别为56.7％和91.0％，而CEA和SCC-Ag的阳性率分别为13.4％和17.2％。同时使用CEA、SCC-Ag和CDC25B自身抗体联合检测，其阳性率（60.4％）显著高于用CEA和SCC-Ag联合检测（26.9％，P<0.0001）。虽然抗CDC25B自身抗体的水平与患者总的生存期并无明显相关性，但是患者血清中抗CDC25B自身抗体的水平与肿瘤的临床分期高度相关（P<0.01），在临床分期为Ⅲ-Ⅵ期的食管鳞状细胞癌患者中，血清中抗CDC25B自身抗体阳性的患者5年生存率仅为6.7％，而阴性的患者为43.4％（P=0.001，log-rank）。同样，在N1期食管鳞癌患者中，血清中抗CDC25B自身抗体阳性的患者5年生存率为13.6％，而阴性的患者为54.5％（P=0.04，log-rank）。
　　 结论：
　　 1、用Eca-109细胞裂解物提纯蛋白作为抗原制备反向捕获ELISA试剂盒，可用于检测食管鳞癌患者血清中抗CDC25自身抗体的表达；
　　 2、与肿瘤标志物CEA、SCC-Ag相比，检测血清中的抗CDC25B自身抗体对食管鳞状细胞癌的临床诊断有更高的价值；
　　 3、抗CDC25B自身抗体可作为判断晚期食管鳞状细胞癌预后的血清学标志物。