声明
第1章 文献综述
1.1 细胞周期
1.1.1 有丝分裂
1.1.2 胞质分裂
1.1.3 家蚕不同组织器官的细胞周期类型
1.2 胞质分裂的组织者Anillin
1.2.1 Anillin的结构
1.2.2 Anillin的细胞定位调节细胞周期进程
1.3 有丝分裂过程中的磷酸化调控研究
1.3.1 Aurora B激酶及其参与细胞分裂的功能概述
1.3.2 Anillin在细胞周期中的磷酸化研究
第2章 引言
2.1 研究背景及目的意义
2.2 研究内容
2.2.1 家蚕Anillin基因编码序列的克隆与时空表达特征分析
2.2.2 家蚕Anillin参与胞质分裂的功能研究
2.2.3Aurora B激酶对Anillin的磷酸化调控研究
2.3 技术路线
第3章 家蚕Anillin基因的全长cDNA克隆与时空表达特征分析
3.1 实验材料与试剂
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验试剂
3.2 实验方法与步骤
3.2.1 相关试剂及配制
3.2.2 RACE扩增方法
3.2.3 RACE产物的PCR验证
3.2.4 BmAnillin原核表达检测
3.2.5 RNA提取
3.2.6 cDNA反转录
3.2.7 RT-PCR
3.2.8 qRT-PCR
3.2.9 丝腺冷冻切片
3.2.10 生物信息学分析所用软件及在线数据库
3.3 实验结果与分析
3.3.1 家蚕BmAnillin基因全长cDNA的克隆及序列分析
3.3.2 家蚕与其它物种Anillin的进化分析
3.3.3 家蚕BmAnillin基因的时空表达特征分析
3.3.4 家蚕丝腺微丝骨架的观察分析
3.4 讨论
第4章 家蚕Anillin在细胞胞质分裂中的功能
4.1 实验材料与试剂
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验试剂
4.2 实验方法与步骤
4.2.1主要试剂及配制
4.2.2 家蚕Anillin基因dsRNA合成
4.2.3 细胞培养
4.2.4 dsRNA干涉
4.2.5 细胞提取RNA
4.2.6 RT-PCR分析
4.2.7 免疫荧光染色
4.2.8 生物信息学分析所用软件
4.3 实验结果与分析
4.3.1 家蚕细胞系中BmAnillin基因的RNAi
4.3.2 家蚕BmAnillin基因RNAi导致胞质分离异常
4.3.3 家蚕BmAnillin基因RNAi导致有丝分裂中期染色体分离紊乱
4.3.4 家蚕BmAnillin基因RNAi导致胞质分裂过程中F-actin纤维的缺失
4.4 讨论
第5章Aurora B激酶对Anillin的磷酸化调控研究
5.1 实验材料与试剂
5.1.1 实验材料
5.1.2 实验试剂
5.2 实验方法与步骤
5.2.1 主要溶液及配制
5.2.2 Anillin序列定点突变
5.2.3 细胞培养
5.2.4细胞周期阻滞
5.2.5 转染
5.2.6细胞蛋白提取
5.2.7 IP实验
5.2.8Western Blot检测
5.2.9免疫荧光检测
5.2.9生物信息分析软件及在线数据库
5.3 实验结果与分析
5.3.1Aurora B激酶对Anillin的磷酸化
5.3.2Aurora B激酶与Anillin的亚细胞共定位及互作分析
5.3.3抑制Aurora B活性导致胞质分裂过程中Anillin分布异常
5.3.4Anillin上Aurora B磷酸化位点的鉴定
5.4 讨论
第6章 综合与结论
参考文献
附件
附件一 用于系统发育分析的各种生物的Anillin 基因目录
附件二 用于Anillin 定点突变的引物序列
硕士期间发表论文及参研课题
发表论文
参研课题
致谢
