对虾杆状病毒1197基因的表达和产物纯化的研究

摘要

该文研究人员用基因克隆的方法将该病毒的早晚期基因1197基因克隆到pGEX-3X、pTXB11和pTYB12表达载体中.该基因从研究人员构建的病毒基因库用PCR的方法进行扩增.合成的引物根据已测得1197基因读框3'及5'端顺合成寡聚核某酸片段.将pGEX3X-1197表达质粒的诱导表达产物超声波破菌后的包涵体,进行处理,得到尿素变性后的高浓度融合蛋白的混合物.用梯度的尿素进行透析,不能恢复蛋白原先结构,而不能与GST亲和柱结合,也因此不能分离到蛋白.将该蛋白混合物用FPLC的方法进行分离,分离的柱为CM阴离子交换柱,用不同梯度的盐浓度进行洗脱,收集到纯的融合蛋白.

目录

致谢

第一部分引言

第二部分实验基础

第三部分pGEX-3X1197表达质粒构建、表达和蛋白质的纯化

第四部分对虾病毒1197基因以pTXB11和pTYB12质粒为表达载体的克隆、表达和蛋白质的纯化

讨论

综述(核酶设计和应用)

参考文献