竹黄分离菌的抗氧化活性及其产物

摘要

竹黄Shiraia bambusicola P.Henn.是一种分布于中国和日本的子囊菌，中药中传统上是以其子座入药，性温味淡，具有止咳祛痛、舒筋活络、祛风利湿、补中益气、活血补血、散瘀通经之功效。人工培养竹黄菌子座很少有成功的结果，目前主要是从野外直接采集。本研究利用竹黄子座分离若干菌株，探讨活性及产物，以通过发酵技术生产活性产物。采用总抗氧化能力测试盒进行了活性菌株的初步筛选，获得了3株抗氧化活性较强的菌株，分别为AJ013菌株、YX015菌株和CA022菌株。采用相对还原力测定法及体外抗脂质过氧化法评价了其总抗氧化活性和抗氧化活性的稳定性。结果表明：3株竹黄分离菌都具有良好的总抗氧化活性及稳定性,其中CA022菌株的总抗氧化能力最高,达到9.68U/mL。采用邻苯三酚自氧化法、亚甲蓝分光光度法和DPPH实验法研究了3株竹黄分离菌发酵液提取物清除超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)和DPPH·有机自由基的能力，结果表明：3株竹黄分离菌都具有较强的清除O2-·的能力，清除率都超过了阳性对照维生素E，其中，YX015菌株在1mg/mL的供试浓度下对O2-·清除率达到49.15％：3株菌株对·OH和DPPH自由基的清除率都弱于维生素E，但在1mg/mL的供试浓度下,CA022对·OH的清除率最高,可达60.43％；YX015对DPPH自由基的清除率最高，达到83.33％。利用有机溶剂萃取、硅胶柱层析和反相C18柱层析等方法对竹黄分离菌抗氧化活性产物进行了分离纯化，获得了两个样品，根据显色反应和紫外-可见光全波长扫描证实为羟基蒽醌类化合物。蒽醌类物质及其衍生物是药用植物中的重要的天然活性产物，具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、解痉和凝血等多种显著的生理活性，已在竹黄子座中有发现报道，本研究为竹黄天然活性产物的研发提供了新的借鉴。