鸡miR-17-5p和miR-20a靶向调控LRIG1基因的鉴定

摘要

microRNA(miRNA)可调控细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程,其具体生物学功能取决于细胞类型和发育阶段等.实验前期研究证明miR17-92cluster参与鸡前脂肪细胞脂肪增殖.为了分析miR-17-92cluster的作用机制,通过miRanda、TargetScan和PicTar等软件共同预测出LRIG1(Leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains protein1)是miR17-92cluster中miR-17-5p,miR-19a及miR-20a的一个潜在靶基因.LRIG1抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.为了验证上述预测结果,开展靶基因的鉴定实验.本研究成功构建出LRIG1的3’UTR区报告基因载体。将报告基因载体与miRNA inhibitor共转染到鸡DF1细胞中，报告基因结果显示：与阴性对照组相比较，加入miRNA-17-5pinhibitor后荧光素酶活性明显升高（P<0.01）；加入miRNA-20a inhibitor后荧光素酶活性升高（P<0.05）；但是加入miRNA-19a inhibitor后与阴性对照组相比荧光素酶活性无显著变化。