鸭胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定

摘要

本研究将鸭胚成纤维细胞传代两次，提取细胞总RNA;利用Clontech SMART技术，以LD-PCR合成双链cDNA;利用同源重组方法，将纯化后的双链cDNA在酵母细胞Y187内构建cDNA文库。结果表明，细胞总RNA的0D260nm／OD2802nm为2．0，文库容量达到5×106cfu，插入的双链cDNA的平均大小为0．65 Kb，文库的重组率为100％。该cDNA文库构建的成功，为筛选与小鹅瘟病毒结合的细胞蛋白奠定了基础。