基于双启动引物PCR方法检测溶藻弧菌的研究

摘要

为建立检测溶藻弧菌(VA)的快速检测方法,本研究以VA Collagenase基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了DPO-PCR快速检测VA的方法.结果显示退火温度范围在48°C～68°C内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与VA的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.14×102CFU/mL.利用该检测方法对采集的550份样品进行检测,共计检出4份VA阳性样品,与行标法(SN/T1870-2007)检测结果一致,显示了良好的实用性.该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性.