自噬对布鲁氏菌在巨噬细胞内增殖情况的影响

摘要

为了探究自噬作用对布鲁氏菌(Brucella)在巨噬细胞(MΦ)内增殖活力的影响,本研究首先将体外培养的MΦ细胞分组,分别采用自噬激活剂-雷帕霉素(Ra)或抑制剂-3-MA处理细胞,并在不同处理的细胞组中接种表达绿色荧光的重组猪种布鲁氏菌(rB.suis-GFP),在接种后0.5～24h后,一方面通过细胞中LC3-Ⅱ含量及MΦ内B.suis数量的测定,另一方面通过激光共聚焦显微镜观察LC3-Ⅱ与B.suis共定位情况.结果显示,感染B.suis后0.5h,MΦ即可发生自噬作用,并且Ra+MΦ+B.suis组LC3-Ⅱ含量显著高于其他组,显示B.suis的感染能够促进MΦ内LC3-Ⅱ的形成,增强MΦ的自噬作用;另一方面,Ra+MΦ+B.suis组胞内B.suis数量均显著高于3-MA+MΦ+B.suis组与MΦ+B.suis组,显示自噬作用能够促进B.suis在MΦ内的增殖;但随着胞内B.suis数量的增加,各组LC3-Ⅱ的水平却逐渐下降,这表明MΦ感染B.suis数量达饱和后,MΦ虽然启动自噬作用而杀灭了部分B.suis,但却不能完全抑制B.suis在MΦ内大量增殖.