马铃薯应答低温胁迫ALDH2基因的筛选分离

摘要

研究以四倍体马铃薯品种“大西洋”为试验材料, 利用MSAP技术分析了4°C处理0、48和60 h后“大西洋”基因组DNA甲基化状态, 获得了814条应答低温胁迫的DNA甲基化差异条带, 并完成了测序和Blast分析, 从中选取了6个感兴趣的序列作为目的基因,其中包括乙醛脱氢酶2(Aldehyde dehydrogenase 2, ALDH2)基因。为了确定ALDH2基因在马铃薯应答低温胁迫过程中的功能, 该研究利用qPCR技术分析了马铃薯在低温处理0, 12, 24, 36, 48, 60和72 h后ALDH2基因表达量, 利用ALDH酶活检测试剂盒(南京建成生物工程公司A075-1-1)测定了酶活性情况。利用Confocal技术对目的基因进行了亚细胞定位分析, 结果表明, ALDH2定位于叶绿体、线粒体中, 且ALDH2基因位于马铃薯3号染色体上。对其他5个目的基因也进行了一定研究, 具体功能及其在马铃薯应答低温胁迫中的作用机理, 需要进一步深入研究。