实验性高原脑水肿动物实验模型的建立与评价七叶皂苷钠对低氧暴露下大鼠血脑屏障的保护作用观察

摘要

目的：探讨实验性高原脑水肿动物实验模型的建立与评价七叶皂苷钠对低氧暴露下大鼠血脑屏障的保护作用及抗渗漏机制.方法：大鼠在模拟高原低氧环境下暴露复合力竭运动建立急性缺氧性脑水肿模型.采用干湿重法测定脑含水量,伊文思蓝示踪法检测BBB通透性,HE染色法观察脑组织病理学改变,硝酸镧示踪法透射电镜观察BBB紧密连接(TJ)和脑组织超微结构,免疫组织化学法和Western blotting检测咬合蛋白(Occludin)的表达,实时荧光定量PCR法检测occlu din、zo-1和claudin-5的基因表达.结果：急性缺氧3d后,与平原对照组相比,高原缺氧组脑含水量显著增加(P＜0.01),缺氧治疗组脑含水量较高原缺氧组显著减少(P＜0.05),EB检测结果与之一致.光镜下见高原缺氧组海马神经元水肿明显,缺氧治疗组神经元水肿减轻;透射电镜示高原缺氧组大量硝酸镧颗粒通过开放的TJ弥散性沉积到脑间质,毛细血管周围水肿明显;缺氧治疗组镧颗粒渗漏减少和水肿程度减轻.Occludin基因和蛋白表达水平在高原缺氧组最低,与平原对照组比较有显著性差异(P＜0.01,P＜0.01),在缺氧治疗组中表达最高,与高原缺氧组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01);同时,与平原对照组比较,高原缺氧组zo-1和claudin-5基因的表达显著下降(P＜0.05),经七叶皂苷钠治疗后zo-1、claudin-5基因表达量较高原缺氧组显著升高(P＜0.01).结论：急性低氧暴露能引起大鼠脑Occludin蛋白和occhdin、zo-1、claudin-5基因表达量显著降低,血脑屏障透性增加;七叶皂苷钠能上调Occludin蛋白和occludin、zo-1、claudin-5基因表达量,降低BBB通透性,起到抗渗漏和保护BBB的作用,因此对大鼠缺氧性脑水肿有一定治疗作用.