基于HRP直接标记的流感病毒H1N1光化学免疫传感器

摘要

构建了一种新型、灵敏的流感病毒H1N1光化学免疫传感器,该免疫传感器利用甲型流感病毒H1N1表面HA(血球凝集素)蛋白有效吸附糖蛋白的特性,选取性质活泼的糖蛋白—辣根过氧化物酶(HRP)作为生物标记物直接标记在病毒抗原的表面,由于HRP能有效催化H2O2—OPDA(邻苯二胺)体系产生灵敏的显色反应,且反应产物具有良好荧光效应,从而可检测流感病毒H1N1.实验表明所构建的光化学免疫传感器对H2O2-OPDA体系表现出快速的颜色变化和荧光响应,对流感病毒H1N1检测的动态响应范围为0.0001～0.5μg·mL-1,检测限达50pg·mL-1(3σ).同时其他亚型病毒及干扰蛋白对该传感器的干扰较小,表现出良好的选择性,并将其应用于血清样品分析,添加回收率109.3％.结果证明HRP可作为一种直接标记物用于流感病毒H1N1的灵敏、便捷、实时监测,所构建的方法可为其他流感病毒及其他抗原的检测提供参考.