免疫原性死亡的B16-F1细胞诱导RAW264.7细胞M1型极化

摘要

目的:肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤组织局部侵润的巨噬细胞,通常极化形成M2型巨噬细胞并发挥免疫抑制效应、促进肿瘤细胞增殖.方法:本研究通过将蒽环类药物诱导发生免疫原性死亡前后的小鼠B16-F1黑素瘤细胞与小鼠RAW264.7巨噬细胞共孵育,观察免疫原性死亡的肿瘤细胞对于巨噬细胞极化和细胞吞噬的影响.结果:流式细胞术分析表明,与正常B16-F1细胞相比,免疫原性死亡的B16-F1细胞能够诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞发生以IL-12高表达、IL-10低表达为特征的M1型极化.细胞杀伤实验表明,RAW264.7巨噬细胞对免疫原性死亡的B16-F1细胞具有更强的细胞杀伤能力.为进一步观察RAW264.7巨噬细胞对B16-F1细胞的吞噬作用,对B16-F1细胞进行了荧光染料Hoechst 333258标记、对RAW264.7巨噬细胞使用Rodamine-CD68抗体进行标记.倒置荧光显微镜观察表明,RAW264.7巨噬细胞对免疫原性死亡的B16-F1细胞也表现出明显的吞噬效应,对正常B16-F1细胞则无细胞吞噬作用.结论:上述研究结果初步表明,免疫原性死亡的B16-F1细胞能够诱导RAW264.7巨噬细胞发生M1型极化.关于这一现象是否与B16-F1细胞膜钙网蛋白有关以及能否诱导M2型巨噬细胞逆向发生M1型极化,尚需进一步的实验研究.