CRTC1-NEDD9信号轴通过调控EMT影响LKB1缺失引起的肺癌转移

摘要

目的:探讨抑癌基因LKB1在肺癌EMT中的作用及其分子机制.方 法:应用细胞培养、Western blot,RT-PCT,免疫共沉淀等技术检测肺癌中抑癌基因LKB1的表达水平;应用Western blot,RT-PCT等技术检测临床肺癌LKB1和NEDD9基因的表达水平及其与肺癌的恶性进展和转移的相关性;应用Western blot,RT-PCT等技术检测肺癌中NEDD9基因表达水平;应用免疫共沉淀等技术检测LKB1基因调控共转录因子CRTC1的核质转位及其对NEDD9的转录表达的影响;应用Western blot,RT-PCT,免疫共沉淀等技术检测肺癌EMT相关分子的表达,以及LKB1和CRTC1-NEDD9对肺癌EMT的影响;应用Boyden和动物模型研究LKB1和CRTC1-NEDD9对肺癌侵袭转移的影响及其分子机制.结果:本研究中发现CRTC1-NEDD9信号轴通过上皮细胞间叶转化这种细胞自主性调控方式赋予了肺癌细胞更高的自身侵袭转移能力,从而介导了LKB1缺失引起的肺癌进展和转移.LKB1通过调控共转录因子CRTC1的核质转位影响NEDD9的转录表达;NEDD9的高表达促进了KrasG12D原发性小鼠肿瘤的进展,反之,shNedd9则抑制了KrasG12D,Lkb1L/L原发性小鼠肿瘤的进展和转移;进一步的体内外研究结果表明NEDD9是通过影响FAK活性来调控肺癌细胞的EMT.此外,临床样本的相关性分析结果显示NEDD9的高表达与肺癌的恶性进展和转移呈显著性正相关,提示NEDD9是潜在的肺癌转移和预后的生物学标记物.结论:LKB1基因通过调控CRTC1的核转位参与NEDD9的表达参与调控肺癌EMT,进而影响肺癌侵袭转移.