同病异证H22肝癌小鼠Tg释放相关酶基因在甲状腺中的表达特征及验证分析

摘要

目的:观察同病异证H22肝癌小鼠Tg分泌相关酶基因在甲状腺中的表达特征及验证分析方法:采用标准化诊法技术筛选出邪毒证、气虚证H22肿瘤小鼠,综合采用Affeymetrix基因芯片等技术,初步获得甲状腺激素前体Tg及其分泌相关的组织蛋白酶基因表达特征;进而重复实验,ELISA法检测血清甲状腺激素T3和T4水平,RTqPCR验证Tg及其Ctsb等主要差异表达酶基因的变化.结果:(1)芯片结果提示,Tg及其释放相关重要的蛋白酶类Ctsb、Ctsd、Ctsl、Napsa、Tppl等在肿瘤早期邪毒证、气虚证呈下调的趋势,且邪毒证甚于气虚证;(2)第二批次血清甲状腺激素ELISA结果表明,T3和T4在邪毒证和气虚证均出现了下调,且与第一批次Tg转录水平的变化相一致;且对Ctsb等基因的RTqPCR验证结果表明,Ctsb、Ctsd、Napsa与第一批次大体一致,Ctsl和Tppl与之虽然不同,但在气虚证表达量大于同期的邪毒证上则始终一致.结论:肿瘤发生后早期,小鼠甲状腺机能受到抑制,其中邪毒证尤甚.