肉苁蓉苯乙醇苷引起MTT假阳性的关键基团研究

摘要

目的:MTT法是一种测定细胞活力、细胞增殖的常用方法,广泛用于药物筛选.采用MTT、LDH法研究肉苁蓉苯乙醇苷提取物对内皮细胞低氧损伤后细胞活力的影响,实验结果相互矛盾:MTT实验表明肉苁蓉苯乙醇苷提取物能增加细胞活力,降低低氧对细胞的损伤;而LDH结果表明该提取物能增加LDH的释放,对细胞有损伤作用.有研究表明,有些化合物会干扰MTT实验,出现假阳性结果.本实验的目的为弄清肉苁蓉苯乙醇苷提取物中是否含有引起MTT假阳性的成分.rn 方法:采用多种色谱和波谱法对肉从蓉苯乙醇普提取物中的化学成分进行分离、鉴定，并采用MTT,CCK-8,LDH,Hoechst33342,Annexin V-FITC/PI方法比较分离得到的化合物是否会引起MTT假阳性。rn 结果:肉从蓉苯乙醇普提取物的MTT结果为假阳性;从肉从蓉苯乙醇普提取物中分离得到两种主要的化合物:松果菊普、麦角出普，其结构中的咖啡酞基是引起MTT假阳性的关键基团。rn 结论:采用MTT法测定具有游离咖啡酞基团的化合物对细胞活力的影响时，可能会出现MTT假阳性结果，应谨慎分析。