IL-18免疫增强EtMIC2鸡球虫核酸疫苗的研究

摘要

本研究旨在将鸡IL-18基因作为细胞因子佐剂与柔嫩艾美耳球虫EtMIC2基因串联到真核表达载体pVAXl.0上构建核酸疫苗,并免疫鸡检测其免疫保护力.利用DNA重组技术,将EtMIC2基因、鸡IL-18基因单独或串联到真核表达载体pVAXl.0上,经酶切鉴定,成功构建了pVAX-MIC2、pVAX-IL-18、pVAX-MIC2-IL-18重组质粒.将各重组质粒用转染试剂Lipofectamine 2000转入293T细胞,并于转染24h后固定细胞进行IFA检测,裂解收集细胞进行Western-blot检测重组质粒在体外的表达情况.通过ELISA检测小鼠血清中特异性抗体明显升高,表明重组质粒在动物体内表达.保护力实验证实串联表达IL-18&EtMIC2免疫保护效果明显高于单独表达组.研究表明,IL-18基因作为细胞因子佐剂的EtMIC2基因串联真核表达DNA疫苗候选株的构建,为研制预防鸡球虫病的基因工程疫苗奠定了基础.