柔嫩艾美耳球虫SO7抗原与DCpep融合重组乳酸菌的制备及免疫效果检测

摘要

本实验将球虫子孢子折光体抗原SO7基因与DCpep融合克隆到穿梭表达载体pSIP-409中,转化至大肠杆菌中,再将其电转化进入乳酸菌,构建重组乳酸菌pSIP-409-SO7和pSIP-409-SO7-DCpep.Western blotting检测表达产物的反应原性.最后应用重组乳酸菌pSIP-409-SO7和pSIP-409-SO7-DCpep免疫雏鸡2周,同时设置对照组.实验结果表明SO7和SO7-DCpep基因在植物乳杆菌NC8中成功表达.pS-IP-409-SO7、pSIP-409-SO7-DCpep重组乳酸菌的动物实验表明,与对照组相比,免疫组鸡临床症状不明显,增重效果明显,盲肠病变显著减轻,盲肠病变计分差异显著(P＜0.01),OPG计数显著降低(P＜0.01).各组雏鸡血清中IgG抗体水平表明,SO7-DCpep组与其他各组相比,血清中IgG水平增加,差异显著(P＜0.05),免疫保护率为86％.本研究成功构建了成功构建穿梭表达载体pSIP-409-SO7-DCpep且融合外源基因在乳酸菌中正确表达.动物试验表明本试验构建的重组乳酸菌可有效抵抗球虫卵囊攻击,具有较好的保护效果.本研究为球虫新型疫苗的开发开辟了新思路.