新孢子虫—新蛋白的鉴定、表达与定位

摘要

本研究通过对新孢子虫基因组数据库的分析、筛选,发现并调取了NCLIV_069640基因,进一步分析发现,NCLIV_069640基因大小为2565bp,有一个开放性阅读框,无内含子,包含1个信号肽及4个跨膜区.大部分氨基酸暴露在蛋白表面,推测具有良好的抗原性.对该基因进行原核表达和纯化,得到与GST融合表达的NCLIV_069640重组蛋白.免疫BALB/c小鼠,制备高滴度抗血清,经Western-blot鉴定,在虫体裂解上清中发现有91KD反应条带,与预测大小相符；应用IFA确定NCLIV_069640定位于新孢子虫表面,为一种新的跨膜蛋白.真核细胞的跨膜蛋白一般在其生命活动中发挥着重要作用,推测该蛋白在新孢子虫的侵入、发育和繁殖中具有重要功能,对其功能的相关研究尚在进行之中.