鸡错配修复基因PMS1的克隆及其mRNA表达的组织差异研究

摘要

本研究克隆鸡错配修复基因PMS1,并对其mRNA在鸡各种组织中的表达进行real-time PCR检测分析.选用市售三黄鸡5只,采集各种组织脏,提取组织中总RNA,设计3对引物对鸡错配修复基因PMS1进行分段克隆测序.同时以β-actin基因作为内参对PMS1基因的mRNA表达的组织差异进行real-time PCR检测分析.结果表明,鸡PMS1基因含有2763 bp的开放性阅读框,编码920个氨基酸,与人PMS1基因氨基酸同源性达58％,N末端保守序列同源性为70％,C末端保守序列氨基酸同源性为65％,含有类似组氨酸激酶的ATPases、DNA拓扑异构酶Ⅱ、HMG盒三个保守的结构域.PMS1基因的mRNA在各种组织中均有不同程度的表达,其中在心脏中的表达量最高,在肌胃中的表达量最低.本试验明确了鸡错配修复基因MS1的序列结构及在组织中的表达差异,为进一步研究错配修复系统在家禽肿瘤发生过程中的作用奠定了基础.