原花青素对H2O2损伤血管内皮细胞凋亡及通路caspase-3的影响

摘要

目的:探讨原花青素(procyanidin)对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用. 方法:体外培养内皮细胞,将细胞分为6组,即空白对照组(Control)、氧化损伤组(H2O2)、氧化损伤加入VitC对照组(VC+H2O2)、氧化损伤加入原花青素5μmol/L、25μmol/L,50μmol/L浓度组(procyanidin-L+H2O2、procyanidin-M+H2O2、procyanidin-H+H2O2).将750μmol/LH2O2作用于加入VitC及不同浓度原花青素预培养24小时的内皮细胞,继续培养18小时(半胱氨酸蛋白酶表达测定时间为14小时),以细胞毒四唑盐(MTT)比色试验、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、流式细胞凋亡、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)活性为检测指标. 结果:原花青素呈剂量依赖性降低H2O2对内皮细胞的生长抑制率,降低MDA、LDH量,增加培养液中No2-/No3-含量,并显著抑制半胱氨酸蛋白酶阳性表达,减少细胞凋亡数量,各指标差异有显著性(P＜0.01). 结论:原花青素可保护和修复过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤,其作用可能与抗氧化、促进NO释放,抑制casapase-3表达有关.