利用慢病毒表达载体干扰梅花鹿角柄骨膜细胞P21基因

摘要

利用慢病毒干扰系统,对东北梅花鹿角柄骨膜干细胞(PP细胞)P21基因进行干扰.结果表明:1)筛选出的两条针对梅花鹿P21基因的siRNA与载体质粒PLVTHM连接成功,并与pMD2.G、pCMV-dr8.9质粒共转染到293t细胞,获得重组慢病毒;2)通过感染PP细胞并利用流式细胞仪进行分选,获得了纯度90％以上的感染细胞;3)荧光定量RT-PCR检测表明P21基因的mRNA水平大幅度下调,干扰效率达到70％.表明本实验成功干扰了P21基因在PP细胞中的表达,获得了低表达P21的PP细胞系,为以后研究P21基因在鹿茸再生过程中的作用奠定了基础.