梅花鹿IFN-β1的原核表达及活性鉴定

摘要

为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素-β1(IFN-β1),本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组质粒pETIFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后,得到高效表达.SDS-PAGE与western blot检测结果表明,重组梅花鹿IFN-β1重组蛋白的分子量大小约为24ku,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的59.02％.将Ni柱纯化的pETIFNβ1诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检测表明表达产物具抗病毒活性.梅花鹿INF-β1基因的表达,为梅花鹿INF-β1的应用奠定了基础.