检测鹿黏膜病病毒LDR-PCR方法的建立

摘要

为准确特异灵敏地检测鹿黏膜病病毒(BVDV),本研究建立了一种新的LDR-PCR方法.首先在病毒的保守区内设计1对LDR探针,LDR探针两端各连有1段引物对应序列,以连接产物为模板进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测结果.通过对LDR反应的退火温度、连接酶浓度及探针浓度等反应条件进行优化,确定了LDR最佳的反应体系,并建立了LDR-PCR方法.结果表明,本方法可以特异地检测BVDV,最低检测限为101个拷贝.此方法的建立为BVDV基础研究和临床应用提供了良好的技术平台,为进一步开发高通量的多病原检测技术提供了技术基础.