生防芽孢杆菌在胡椒根表定殖情况研究

摘要

本研究利用荧光标记技术，将携带绿色荧光蛋白编码基因（gfp）的穿梭载体 pAD43-25 转入生防芽孢杆菌 VD18R19 菌株后，通过荧光显微观测和平板计数方法检测生防芽孢杆菌在胡椒根表定殖情况。结果发现：1）生防菌 VD18R19 易于 Spizizen 方法转化，转化效率与 B.subtilis 168 菌株相当；2）标记后的 VD18R19 能够被激发出明亮的绿色荧光且具有良好的遗传稳定性；3）该生防菌在胡椒根系各部位均可定殖，偏好在根毛区定殖。4）该菌株在根系定殖数量呈先升后降的抛物线趋势，在处理后 10 天时定殖密度最高（达 2.31×107CFUs/g），直至处理后 30 天后定殖密度依然保持在 106CFUs/g 以上。本研究揭示生防芽孢杆菌在胡椒根表定殖的时空动态，有助于认识和理解生防菌与胡椒之间的互作机制，对利用生防菌绿色高效防控胡椒瘟病具有积极意义；此外发现生防菌 B.subtilis VD18R19 容易遗传操作，为后续生防芽孢杆菌分子机理研究提供良好材料基础。