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小鼠PICK1基因真核表达载体myc-PICK1的构建

摘要

目的:构建小鼠PICK1基因的真核表达载体myc-PICK1.方法:从小鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PICK1序列,所得片段及真核表达载体pRK5-myc用SalⅠ和NotⅠ双酶切,后连入pRK5-myc载体中.重组质粒经SalⅠ和NotⅠ双酶切鉴定后送公司测序.结果:PCR扩增得到预期1.2 kb大小的目的片段,经SalⅠ和NotⅠ双酶切鉴定正确重组质粒送公司测序,结果与预期一致.Myc-PICK1重组质粒转染Hela细胞,进行免疫染色能看到定位于胞浆的蛋白表达.结论:成功构建了myc-PICK1载体,为后续研究奠定了基础.

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