用电转染技术表达EGFP标记间充质干细胞进行体内追踪研究

摘要

目的：为探讨干细胞移植后的体内迁移和定向分化,寻找非损伤性的方法标记移植的细胞,用加强的绿色荧光蛋白(EGFP)作为报道基因标记间充质干细胞分析了EGFP标记细胞在体内移植后的荧光变化. 方法：本研究利用电穿孔方法进行加强的绿色荧光蛋白质粒(pCVM-EGFP)转染产生具有EGFP标记的牙髓干细胞,皮肤成纤维细胞,脐带间充质干细胞.然后将EGFP标记的脐带间充质干细胞注射到裸鼠皮下,在不同时间用小动物活体成像系统观察了EGFP标记细胞在体内的荧光变化. 结果：用电穿孔方法能够在体外产生高效表达的标记细胞,EGFP在牙髓干细胞,皮肤成纤维细胞,脐带间充质干细胞中的表达超过80-85％,EGFP标记的脐带间充质干细胞注射到裸鼠皮下后表达荧光持续1周以上,能够利用小动物活体成像系统检测到移植细胞在体内的荧光变化情况. 结论：电穿孔技术能够产生高效表达EGFP的细胞用于追踪细胞体内移植后的定位与迁移,为探讨干细胞移植治疗作用提供了实验技术手段.