IGF-1R信号通路及上皮-间质转化在人肺腺癌A549细胞EGFR-TKIs获得性耐药中的作用

摘要

目的：探讨胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(insulin-like growth factorⅠreceptor,IGF-1R)信号通路及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在EGFR野生型非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) A549细胞对表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)获得性耐药中的作用.rn 方法：选用EGFR野生型、K-ras突变型的人肺腺癌A549细胞,用吉非替尼将其诱导成耐药细胞A549/GR.MTT法检测细胞增殖,划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞侵袭转移能力,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测EMT标志分子及IGF-1R信号通路相关分子的mRNA和蛋白表达.rn 结果：A549/GR为EGFR-TKIs获得性耐药细胞,其对吉非替尼的敏感性显著下降(P＜0.05).与A549细胞相比,A549/GR细胞形态呈现间质化改变,侵袭和转移能力均显著增加(P＜0.05).A549/GR细胞中间质标志Vimentin的mRNA和蛋白表达量均显著增多(P＜0.05),上皮标志E-cadherin的表达量显著减少(P＜0.05).与A549细胞相比,A549/GR细胞IGF-1R的mRNA和蛋白及其磷酸化表达量均未见明显改变(P＞0.05),而AKT磷酸化水平及其mRNA水平明显上调(P＜0.05),ERK蛋白及其磷酸化和mRNA表达量均明显增加(P＜0.05).A549/GR细胞的EGFR及其磷酸化蛋白表达量较A549细胞明显下降(P＜0.05).rn 结论：EMT及AKT和ERK信号通路的激活均可能在EGFR野生型非小细胞肺癌A549细胞的EGFR-TKIs获得性耐药中起重要作用,但获得性耐药与IGF-1R表达无关.