多元PCR在黑鲍微卫星遗传研究中的应用

摘要

多元PCR(MultiplexPCR)是一种在同一个反应中同时扩增两个或多个位点的聚合链式反应.根据D03等十一个微卫星引物单位点PCR扩增时优化的扩增条件(退火温度、MgCl2等)、十一个微卫星引物所带有的荧光颜色、等位基因大小变异范围及反应的灵敏度,可将十一个微卫星引物分成A组(D03,G04,B04和H08)、B组(A09,H11,A08和G01)和C组(1.24,2.30和2.23)进行多元PCR扩增.结果表明各组内位点之间的分离清晰可见:(1).D03,G04,B04和H08四个位点(从上到下依次为H08:兰色;B04:黄色;D03:绿色;G04:兰色);(2).A09,H11,A08和G01四个位点(从上到下依次为A08:兰色;A09:绿色;H11:黄色;G01:黄色);(3).1.24,2.30和2.23三个位点(从上到下依次为2.30:绿色;2.23:兰色;1.24:黄色).多元PCR是一种快速和方便的研究方法.它不仅能有效地节省大量的时间、实验室的经费支出和大大地提高了微卫星检测仪器的使用效率而且还可以提高实验效果。