病/证因素对附子毒性成分代谢的影响

摘要

目的:中医理论认为,中药毒性的有无、大小与机体的状态(即病/证)有关,早在《黄帝内经》即有"有故无殒"之说.附子(Radix Aconiti Lateralis Preparata)亦药亦毒,既有强心、抗休克、抗心律失常、心肌保护、抗炎、镇痛等作用,也有明显的心脏毒性和神经毒性.前期研究发现,病/证状态对附子毒性有显著影响.本研究旨在观察病/证状态下附子(黑顺片)毒性成分的代谢,初步探讨"病/证-毒"相关的药代动力学基础.rn 方法:① Ⅱ型胶原(CⅡ)所致类风湿性关节炎模型(RA)复制:牛CⅡ与弗氏完全佐剂(CFA)超声混匀，制成含C Ⅱ2mg/m】的乳剂。模型组大鼠每只左后足底皮内注射100μ1乳剂，7天后以同种乳剂尾根部100μ1再次免疫，空白组注射生理盐水。②寒性刺激法复制寒痹模型:上述CⅡ所致RA大鼠及正常大鼠，置于人工气候箱中，设定温度5℃，湿度95%，模拟寒邪。每天刺激4-6h，连续35天。③热性刺激法复制热痹模型:上述CⅡ所致RA大鼠及正常大鼠，置于人工气候箱中，设定温度35℃,湿度80%，模拟热邪。每天刺激4-6h，连续35天。④急性心衰模型复制:大鼠以乌拉坦腹腔注射麻醉，分离右颈总动脉，左心室插管，记录左心室收缩压(LUSP)、左心室舒张末期压(LUEDP )、左心室内压最大上升和下降速率(±LVdp/dhmax)。描记30min后，于股静脉注射尼莫地平注射液0.6 mg/kg.⑤药代动力学参数测定:黑顺片、附子复方(芍甘附子汤)灌胃给药，RA大鼠分别于给药前及给药后5, 10, I5, 30, 45, 60, 75, 90, 120, 180, 240, 360, 720, 1440min于大鼠眶后取血。心衰大鼠经十二指肠给予黑顺片复方(破格救心汤)，于药后5,10,15,30,45,60,75,90min取血。Waters HLB (60mg sorbent)柱固相萃取方法处理样本，氢澳酸高乌甲素为内标，采用液一质联用法测定乌头碱(AC)、新乌头碱(MA)、次乌头碱(HA),苯甲酞乌头原碱(BAC)、苯甲酞新乌头原碱(BMA)、苯甲酞次乌头原碱(BHA)含量。rn 结果:①大鼠单次灌胃黑顺片或黑顺片复方芍甘附子汤后，与正常组相比，RA模型组、RA十寒组、RA十热组HA, BAC, BMA, BHA Cmax明显降低，AUC下降，CL升高，其中以RA+寒组最为明显。Cmax由高到低的顺序为:正常组>RA模型组>RA+热组>RA+寒组。经房室拟合，HA, BAC, BMA, BHA药动学均符合二室模型。②与正常组相比，在15-90min期间，急性心衰模型大鼠各时间点HA的血药浓度明显降低。rn 结论:病/证状态对黑顺片毒性成分的药动学过程有明显影响，初步提示“病/证一毒”相关具有其药动学基础。