中国五地区的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶分布

摘要

目的:明确我国五个不同地区医院中亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属酶的基因型分布及其基因定位,推测耐药基因的来源及传播机制. 方法:收集国内五个地区临床分离的140株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌.采用琼脂稀释法及Etest法检测其对常用十种抗菌药物的耐药性;双纸片法进行金属酶筛选,PCR法扩增金属酶基因型和整合子;采用脉冲凝胶电泳(PFGE)对产金属酶菌株进行同源性分析;采用接合试验、质粒的提取及电转化、DNAsouthern杂交确定基因定位. 结果:金属酶筛选试验共检测出产金属酶表型阳性菌株12株.PCR扩增出13株VIM-2阳性菌株,其中12株扩增出两种不同长度的整合子,分别携带aacA4、VIM-2及aacA4、VIM-2、aadB基因盒.Southern杂交证实VIM-2基因位于XbaI酶切染色体PFGE大约50kb大小的片段上. 讨论:我国亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属酶分离率较低,主要流行的金属酶基因型为VIM-2型,其基因盒散布在位于染色体上的不同整合子中.