李痘病毒CP基因在大肠杆菌中的表达、纯化及其抗血清制备

摘要

用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其克隆到原核表达载体pET29(a)上,得到p(E)T29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达.分别用亲和柱法和切胶法回收特异性表达蛋白,再免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定,其效价分别为3.2×104和4×103,且具有较高的特异性。