骨髓基质细胞经CM-Dil标记后的活性及移植到损伤脊髓的示踪观察

摘要

目的：探讨骨髓基质细胞(BMSCs)经CM-Dil荧光染料标记后的生物活性及移植后在损伤脊髓中的迁移和分布。方法：取Wistar大鼠的第3代BMSCs消化后分两组，实验组和对照组，实验组以CM-Dil标记，另一组正常细胞不标记，测定生长曲线。以改良Allen法制备脊髓损伤模型，将CM-DiI标记的BMSCs通过蛛网膜下腔注射移植，分别于移植后24h、1w、2w、3w、4w取损伤脊髓段作冰冻切片，倒置荧光显微镜下观测移植的BMSCs在损伤脊髓中的迁移和分布规律。结果：BMSCs经CM-Dil荧光染料标记成功率100%，实验组和对照组的生长曲线基本吻合；移植后24h，脊髓损伤区未见标记细胞，移植后1w，标记的BMSCs开始迁移到损伤区硬脊膜下，移植后2-3w，BMSCs迁移、聚集在损伤脊髓的中心，移植后4w，仍有标记细胞聚集在脊髓损伤中心。结论：1．BMSCs经CM-Dil荧光染料标记后的生物活性保持正常：2．CM-Dil标记的BMSCs移植后能迁移聚集在损伤脊髓的中心，CM-Dil在活体内至少能维持4周