As2O3诱发获得性LQTS的机制及药物逆转作用

摘要

目的:探寻As2O3诱发的hERG通道蛋白表达异常的机制及逆转此作用的药物.rn 方法:采用全细胞膜片钳技术，测定苦参碱和氧化苦参碱对稳定表达在HEK293细胞中hERG通道电流和hERG通道动力学的影响;采用Western Blot技术，测定hERG通道蛋白及Spl蛋白表达;采用Spl-decoy技术研究Spl与hERG通道蛋白的关系:RT-PCR技术测定miRNA表达量。rn 结果:1μM苦参碱或氧化苦参碱孵育24h能逆转As2O3诱导的hERG通道蛋白表达减少，并增加hERG电流。在豚鼠心室肌细胞中，苦参碱和氧化苦参碱可显著缩短As2O3引起的动作电位时程延长。进一步研究显示As2O3抑制hERG通道蛋白表达的机制是因其抑制核转录因子Spl的表达而影响转录过程。药物逆转的机制是通过上调核转录因子Sp1的mRNA和蛋白表达，进而增加hERG蛋白表达水平，拯救As2O3的作用。此外研究显示As2O3促进miR23 a的表达，抑制Hsp90与hERG蛋白复合体的形成，从而抑制hERG蛋白的运输过程，而其抑制剂反义寡核昔酸AMO-23a可以逆转上述过程。rn 结论:As2O3抑制hERG通道蛋白表达的机制是通过抑制转录和蛋白运输过程，苦参碱和氧化苦参碱通过促进hERG通道的激活以及上调Spl表达增加hERG通道蛋白表达逆转As2O3的作用。