负载灭活口蹄疫病毒的树突状细胞以蛋白酶体非依赖方式活化CD8+T细胞

摘要

目的：探讨负载灭活口蹄疫病毒(FMDV)的树突状细胞加工提呈抗原的机制。方法：用信号阻断的方法制备CD4+T和CD8+T细胞，用溶酶体抑制剂氯喹和蛋白酶体抑制剂lactaeystin分别处理单核细胞源树突状细胞(MoDCs)，再负载灭活FMDV，并分别与CD4+T和CD8+T细胞共培养，用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果：同对照组相比，与负载FMDV的MoDCs共培养后的CD4+T细胞和CD8+T细胞均产生高水平的IFN-γ;在共培养后9 h和48 h，CD4+T细胞和对照组比较，差异均为极显著(P<0.01);共培养后24 h和36 h，CD4+T细胞和对照组比较，差异均有显著性(P<0.05)，并且在各个时间点，CD4+T细胞产生的IFN-γ量都比CD8+T细胞多;当用抑制剂lactacystin后CD8+T细胞的IFN-γ释放量升高，而使用氯喹后CD4+T细胞的IFN-γ释放量降低。用灭活FMDV负载被lactacystin和氯喹处理的DCs与CD8+T细胞共培养后9～12 h，CD8+T细胞产生IFN-γ显著减少，在共培养24 h。IFN-γ释放显著增多，并在36 h达到峰值，与对照组相比，差异有统计学意义。结论：负载灭活口蹄疫病毒的MoDCs能以蛋白酶体非依赖方式活化CD8+T细胞。