125I标记Smac多肽及其在小鼠体内的分布研究

摘要

目的：线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO(second mitochondrialactivator of caspase/direct IAPbinding protein with low pl).是近年来研究较多的促凋亡因子，成熟的Smac蛋白通过其氨基端前4个氨基酸：丙氨酸—缬氨酸—脯氨酸—异亮氨酸(AVPI)与凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis proteins，IAPs)结合，从而解除IAPs对caspase的抑制，发挥促凋亡作用。大多数肿瘤高表达IAP。转染全长Smac基因或使用Smac N端短肽能提高TRAIL或化疗药物诱导的凋亡[4-6]。因此，利用Smac多肽可特异性结合IAP，将其与细胞穿膜肽连接，合成可穿透细胞的融合多肽后进行放射性标记，可望用于肿瘤显像及放射核素靶向治疗。本文主要探讨其碘标记条件，并进行正常昆明小鼠体内的分布情况研究，为进一步肿瘤显像实验奠定基础。探讨。1251标记线粒体促凋亡蛋白Smac多肽的方法。观察其在小鼠体内的生物学分布。方法：Smac N-端8肽与穿膜肽融合后，采用N-溴代琥珀酸亚胺(N-bromosuccinimide，NBS)作为氧化剂进行1251标记，纯化后在昆明小鼠体内进行生物学分布实验。结果：1251-Smac N8标记率为74.7±5.89％，放化纯为95.2±1.26％，室温放置6h后放化纯仍可达93.4±0.65％。标记产物经肾脏排泄，血液清除快，主要在肝、脾、肺、甲状腺、胃、肠和骨中分布，其放射性1～4h达高峰，24h基本清除。结论：放射性碘标记Smac N8多肽放化纯高，稳定性好，血液清除快，适合进行下一步肿瘤显像研究。